摘要
目的：研究异鼠李素对H2O2所致人脐静脉内皮细胞株ECV304氧化性损伤的保护作用及其作用机制。 方法：采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV304，用MTT法筛选H2O2致细胞损伤的最佳浓度，在模型的基础上，用MTT法测定异鼠李素对内皮细胞相对活力的影响；ELISA法检测内皮细胞培养液t-PA和PAI-1含量；RT-PCR技术测定PAI-1mRNA的相对表达；ELISA法检测内皮细胞培养液vWf和TM含量；流式细胞仪测定内皮细胞坏死率和平均荧光强度的变化；荧光分光光度法测定内皮细胞培养液中LDH的含量；WesternBlot法测定内皮细胞caspase-3的活性；共聚焦激光扫描显微镜测定细胞内游离钙离子浓度的变化。 结果：与H2O2损伤后的模型组相比，异鼠李素可以抑制PAI-1的分泌，升高t-PA和PAI-1的比值，并能下调PAI-1mRNA的表达；异鼠李素可以使培养液中vWf和TM含量减少，降低内皮细胞坏死率和平均荧光强度，减少培养液中LDH的含量;异鼠李素可以降低caspase-3活性，减少细胞内游离钙离子浓度的增加幅度。 结论：异鼠李素具有内皮细胞保护作用，其保护作用机制与其抑制细胞内钙离子浓度的升高和其降低caspase-3的活性有关。
NETL