摘要
目的： 研究丹参酮ⅡA(TanⅡA)诱导人卵巢癌A2780细胞凋亡的作用，探讨其作用机制，为TanⅡA应用于临床治疗卵巢癌提供理论依据。 方法： MTT法检测人卵巢癌A2780细胞经TanⅡA药物处理后细胞的增殖情况，计算细胞抑制率=(1—实验组吸光度值/对照组吸光度值)×100％。实验重复三遍，取三次结果的平均值。然后以药物浓度为横坐标，以细胞抑制率为纵坐标，用Excel软件绘制出细胞生长抑制曲线，并用IC50计算软件计算出药物作用细胞的半数抑制率(IC50)。 流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡，实验分为空白对照组(对照组)和实验组。其中实验组依据4.0 mg/L TanⅡ A作用于卵巢癌A2780细胞时间的长短不同，又分为24h组、48h组、72h组三个组。每个组均设3个平行样本。细胞以1×105的浓度接种到25cm2的培养瓶中。收集对照组和实验组的细胞，进行固定、染色，通过FCM检测细胞凋亡，定量测定细胞凋亡率。 Western blotting法(按试剂盒说明书操作)分别检测对照组及实验组的细胞中Bc1-2及Bax两种蛋白表达变化情况。 结果： 1．TanⅡ A对人卵巢癌A2780细胞的增殖具有抑制作用，其作用强度随着药物作用时间及浓度的增加而增强，呈时间—剂量依赖性。TanⅡA作用A2780细胞48h的半数抑制率为7.78mg/L。 2．流式细胞仪显示，经4.0 mg/L TanⅡA处理后，凋亡的卵巢癌A2780细胞明显增多。FCM定量显示0，24，48，72h的凋亡率分别为4.52％，19.7％，25.3％，40.40％。随着时间的延长，凋亡细胞增多，72h的凋亡率达到最高值，与对照组比较，24、48、72h药物作用组凋亡率增高有统计学意义(P＜0.05)。 3．Western blot检测各组细胞Bax及Bc1-2两种蛋白表达情况，结果表明与空白组相比，实验组中Bax的表达均有所增加，而Bc1-2的表达则有所减少(P＜0.05)，Bc1-2/Bax比值明显下降。 结论： 1．TanⅡA对人卵巢癌A2780细胞具有明显的增殖抑制和诱导凋亡的作用。 2．TanⅡA诱导人卵巢癌A2780细胞凋亡的机制可能与下调Bc1-2的表达，以及上调Bax的表达有关。
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