摘要
以水解度和对O2·清除率为指标，采用正交试验对碱性蛋白酶酶解荞麦清蛋白、谷蛋白的工艺进行探索，实验结果表明清蛋白酶解最佳工艺为：温度50℃，pH值10，底物浓度20 g/L，酶底比为10%。在此条件下，水解度可达17．57%，对O2—·清除率达37．06%。谷蛋白酶解最佳工艺为：温度45℃，pH值10，底物浓度30 g/L，酶底比为10%。此时，水解度可达20．72%，对O2—·清除率达45．27%。 清蛋白酶解产物通过Sephadex G—25柱层析分离，得到组分Ⅰ、组分Ⅱ，测得分子量范围分别为20．89～204．2 kDa，219～691 Da。组分Ⅱ对O2—·、·OH、DPPH·的清除能力较强，其IC50分别为：0．072mg/mL，0．26mg/mL，0．32mg/mL；组分Ⅱ可以显著抑制H2O2诱发的小鼠红细胞的溶血反应，终浓度为1．56mg/mL时抑制率达42%；组分Ⅱ氨基酸组成中Glu含量最高，达12．34 mg/100mg，Asp、Arg、Glv、Lvs含量也较高。 谷蛋白酶解产物通过Sephadex G—25柱层析分离，得到组分Ⅰ和组分Ⅱ，测得分子量范围分别为20．89～95．5 kDa，2138～4570 Da。组分Ⅰ对O2—·、·OH、DPPH·的清除能力较强，其IC50分别为：0．21mg/mL，0．24mg/mL，0．31mg/mL；组分Ⅰ可以显著抑制H2O2诱发的小鼠红细胞的溶血反应，终浓度为0．6716mg/mL时抑制率达56%；组分Ⅰ氨基酸组成中Glu含量最高，达9．76mg/100mg，Asp、Cvs、Val、Arg含量也较高。
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