摘要
本课题通过蓝藻体系对黄芩苷进行生物转化研究，旨在探讨蓝藻作为生物转化体系的可能性及其生物转化能力和转化特点，为蓝藻生物转化体系的建立提供依据，并为改变和改善黄芩苷结构与活性寻找一条新的途径。 首先建立稳定的蓝藻培养体系，包括蓝藻7002的分离纯化、MA培养基的确定、液体及固体培养、藻种的保藏、测定生长曲线等。聚球藻7002在MA培养基中为pH5—7.5，温度30-35℃，转速120rpm的条件下均可以生长，但是35℃，pH7.5，转速120rpm是其最佳生长条件。两周蓝藻7002就能从OD7000.3长到0.8。 对黄芩苷在培养基中的稳定性研究中，主要考察pH、温度对黄芩苷的影响，通过照片比对以及薄层色谱法可以从而得到黄芩苷能够稳定存在的条件范围，在pH值在4.5—5.5范围内时，黄芩苷可以稳定存在，当达到6.8时黄芩苷含量减少了。温度对于黄芩苷来说影响不大，当达到35℃时候黄芩苷依然稳定存在，而且35℃是蓝藻PCC7002最佳生长温度。 因此初步确定了PCC7002的转化条件为：MA培养基，温度35℃，pH值为5.5，转速120rpm，底物浓度为0.1mg/ml，反应3天；6803和7120转化条件为：BG11培养基，温度30℃，pH值为5.5，转速120rpm，底物浓度为0.1mg/ml，反应3天。 通过初步的体系筛选，蓝藻7002、6803可以对黄芩苷产生一定影响，7120对黄芩苷无任何改变作用。 本实验又进行了转化产物的薄层色谱和高效液相色谱检查方法的建立，确定了最佳的薄层条件：展开剂比例为乙酸乙酯—丁酮—甲酸—甲醇(10：7：0.5：1)。高效液相色谱的条件：流速1ml/min；柱温40℃；检测波长，280nm；进样量，10μl；采用甲醇—水—磷酸(47：53：0.2)系统等度洗脱。各样品峰型对称，标准品保留时间为19.5min，转化产物的保留时间为30min左右。通过重复实验确定了7002对黄芩苷有一定的转化作用，薄层和液相显示产物极性变大；而6803则有降解黄芩苷的作用，薄层和液相均没有新的成分出现，而且原成分消失。本实验确定了蓝藻作为一种新的生物转化体系的可行性。
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