草莓(Fragaria ananassa Duch)属于蔷薇科草莓属多年生草本植物，是一种重要的经济浆果，在世界范围内广泛种植.然而草莓安全越冬和耐寒品种的缺乏成为生产上的突出问题.生物技术的飞速发展为解决这一问题提供了新的途径，水稻转录因子RdreBIBI是一个到目前为止还未见有RdreBIBI基因转化草莓的研究.因调控植物发育且与植物胁迫抗性相关的转录因子.已有研究证明将RdreBIBI基因转化拟南芥，拟南芥植株的抗早性和耐寒性有很大提高。此本试验目的是用根癌农杆菌介导的转化方法将水稻RdreBIBI基因导入草莓细胞，获得抗寒的转基因植株.主要研究结果有以下几点： 1.以草莓‘丰香’、‘雪蜜’、‘鬼怒甘’的叶片和叶柄为外植体，建立了高效离体再生体系.‘丰香’叶片和叶柄的最佳不定芽再生培养基为：MS+TDZ(2.0mg/L)+IBA(0.2mg/L)+2，4-D(O.lmg/L)和MS+B5+TDZ(2.0mg/L)+IBA(0.2mg/L)+2，4-D(0.1mg/L).‘雪蜜’叶片和叶柄的最佳不定芽再生培养基为：MS+TDZ(1.5mg/L)+IBA(0.2mg/L)和MS+B5+TDZ(2.0mg/L)+IBA(0.2mg/L).‘鬼怒甘’叶片和叶柄的最佳不定芽再生培养基为：MS+BA(2.0mg/L)+IBA(0.1mg/L)和MS+BA(2.0mg/L)+IBA(0.1mg/L)；‘丰香’、‘雪蜜’暗培养时间为14天，‘鬼怒甘’暗培养时间为7天；‘丰香’、‘鬼怒甘’叶片不定芽再生的最佳叶龄为10-30天，‘雪蜜’叶片不定芽再生的最佳叶龄为20天以下.三个草莓品种叶柄不定芽再生的最佳叶龄都是20天以下；叶片放置方式对三个草莓品种的叶片不定芽再生没有影响，叶柄刻伤向上放置有利于三个草莓品种叶柄不定芽再生。 2.克隆了rd29A启动子，通过对比分析，与已公布的序列有98.72%的同源性，主要调控区域也一致，构建了两个植物表达载体pYH4215-rd29A和pYF7713-Rdre。 3.通过研究影响遗传转化的因素，建立了农杆菌介导的‘雪蜜’草莓遗传转化体系：菌液浓度为OD600-0.4；侵染时间为9min；选用200mg/L的Cb作为抑菌抗生素，20mg/L的Kan作为筛选抗生素；共培养时间3天；共培养培养基：MS+TD2(2。0mg/L)+IBA(0.2 mg/L)；筛选培养基：MS+TD2(2.0mg/L)+IBA(0.2mg/L)+Kan(20mg/L)+Cb(200mg/L)；伸长培养基：MS+6-BA(0.5mg/L)+NAA(0.1mg/L)+Kan(20mg/L)+Cb(200mg/L)；生根培养基：MS+IBA(0.1mg/L)+Kan(20mg/L)+Cb(200mg/L)。 4.获得了Kan抗性的含有RdreBIBI基因的草莓转基因株系15株，PCR以及RT-PCR检测证明，有4个株系外源基因已经成功的导入和整合到草莓基因组中.脯氨酸含量的测定和低温处理表明，转基因的植株较非转基因植株抗寒性有所提高。
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