摘要
自1981年发现首例艾滋病，该病已成为威胁整个人类健康的重大传染病，受到科学界和政府的重视。艾滋病动物模型是研究其致病机理，开发治疗方法和治疗药物的条件和基础。人免疫缺陷病毒(HIV)除黑猩猩外很少感染其它动物，给模型的制作带来困难。实验证明，来源于非洲绿猴的猴免疫缺陷病毒(SIV)能人工感染猕猴，产生人类AIDS疾病的临床症状，是目前应用于AIDS研究较好的一种动物模型。由于艾滋病毒直接破坏人的免疫器官，因此，猕猴感染与体内的免疫之间存在密切的关系。虽然猕猴SIV感染模型的研究和应用已经历了二十多年，但是，至今没有标准化，导致感染猕猴的指标存在较大差别，模型数据比较困难，应用受到限制，所以，模型的研究一直没有中断，希望利用各种方法不断改善模型，使其更符合HIV感染的应用研究。 本论文将用SIVmac251病毒，静脉接种3—4岁雄性恒河猴(thesus monkey)，采集外周血液，利用荧光定量PCR方法、流式细胞术、免疫学技术和病理诊断技术，进行感染猴血浆病毒量、血细胞分类、T淋巴细胞亚群、抗SIV抗体、免疫因子和组织病理的检测。 结果显示，5只感染恒河猴中，477猴感染510d死亡，表现消瘦、衰竭状态；649、623猴感染690d，471、093猴感染224d处于安乐死。根据感染猴的血浆病毒载量和相对应的临床指标的变化，649、623、477猴经历了感染急性期、无症状潜伏期、艾滋病相关复合征(ARC期)，未出现典型AIDS期。471、093猴经历了感染急性期和无症状潜伏期。 在感染急性期，5只猴出现一过性的高病毒血症，同时伴随着外周血白细胞数、淋巴细胞数和CD4细胞数的显著下降，不能产生抗SIV病毒抗体，细胞免疫因子IFN—γ—过性上升，IL-12一过性下降，不产生IL—2、IL—4、IL-10、TNF-α。 在无症状潜伏期和ARC期，血浆病毒载量维持在104 RNA copy/mL以上，对649、623、477猴各检测指标的感染后期与前期相比，血浆病毒载量出现上升或下降，同时，外周血白细胞数、淋巴细胞数、单核细胞数、血红蛋白、红细胞压积等指标显示下降趋势；CD3+、CD4细胞数出现缓慢下降趋势。抗SIV抗体逐渐上升，并维持较高水平，细胞因子IFN—γ、IL-12、IL—2、IL—4、IL-10、TNF-α维持感染前水平，未出现明显的变化。 病理诊断，不同感染时间段的淋巴结活检，以及对感染224d的471、093猴、感染690d的649、623猴，感染510d的死亡的477猴尸检，显示慢性淋巴结综合征。感染早期，淋巴结呈增生变化，淋巴滤泡的变化从小而少到大而多，生发中心逐渐发育。感染224天471、093猴，淋巴结表现增生型改变。淋巴滤泡呈不同程度增大，生发中心扩大，中心内有较多活化的B淋巴细胞，副皮质区增宽，微血管数量增多。感染690d的649、623猴表现退化型改变。淋巴滤泡大小不等，有的消失，周围被成纤维细胞包裹，生发中心变小，副皮质变薄或消失，微血管增多；感染510d死亡的477猴表现耗竭型改变。淋巴滤泡和生发中心消失，副皮质区破坏，髓质紊乱。 综上述，SIV感染恒河猴显示与人HIV感染相一致的变化。血浆病毒载量的变化是确定感染是否成功的关键指标，是进行疾病进程分期的重要参数。人感染HIV在ARC期能观察到病毒载量的显著上升，再次出现高病毒血症，SIV感染恒河猴在ARC期出现病毒载量上升或下降，但不表现高病毒血症。 AIDS病是一种破坏免疫功能的重要传染病，病毒感染与免疫应答的关系是该病研究的中心环节。CD4细胞的下降是艾滋病临床评价的另一个重要参数，SIV感染恒河猴在整个感染过程中也显示下降的趋势。由于实验猴与人在物种上的差异，以及SIV和HIV病毒的差异，恒河猴感染SIV还不能与人感染HIV一样，应用CD4细胞数去评价ARC期和AIDS期。而且临床评价的另一个重要参数CD4/CD8比值，也不能应用于SIV感染模型的评价。其它临床指标白细胞数、淋巴细胞数、单核细胞数、血红蛋白、红细胞压积的变化都显示与人HIV感染相似的变化。 细胞因子和免疫抗体的变化也显示机体免疫功能的变化。在感染急性期，IFN—γ的一过性升高，IL-12—过性下降，说明SIV病毒能够刺激机体产生IFN—γ，同时抑制T细胞的激活，不产生IL—2、TNF-α、IL—4、IL-10等细胞因子，抑制抗病毒抗体的产生。进入感染的无症状潜伏期和ARC期，抗病毒抗体逐渐升高，病毒载量维持稳定的变化，病毒复制与机体的抗病毒处于平衡状态，即使在疾病晚期，病毒载量的变化趋势较弱，仍不能检测到IFN—γ、IL-12、IL—2、TNF-α、IL—4、IL-10等细胞因子，这与人感染HIV的细胞因子变化不同。因此，体内细胞因子的变化反映了机体的免疫功能机体的变化，可以应用于预测疾病的进展。
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