摘要
布鲁氏菌病是布鲁氏菌侵入机体引起变态反应的人畜共患传染病。该病广泛分布于世界各地，在许多国家都有不同程度的流行。人患此病主要由于接触感染的家畜，病期可长达数月、数年，甚至几十年，严重时可致残，丧失劳动能力，家畜患布病后出现流产、死胎、不孕、乳腺炎和睾丸炎等，造成巨大经济损失，严重影响畜牧业发展。布病的治病机理尚完全清楚，相关的毒力因子主要包括：脂多糖(LPS)，整和宿主因子(IHF)，外膜蛋白，胞浆蛋白BP26，Cu/Zn超氧化物歧化酶，热休克蛋白，Ⅳ型分泌系统等。已有相对有效的疫苗，但是感染后的家畜很难区分是自然感染还是免疫接种感染。为了区分是自然感染还是疫苗接种感染，在s19的基础上构建了基因突变株△s19，用于区分是自然感染还是疫苗接种感染。经过前基因组学及疫苗免疫接种实验都证明该菌株构建成功，出于前基因组的局限性不能说明基因改造后蛋白质变化情况。基于此，应用蛋白质组学的方法，对改造后的蛋白质进行了验证。 对两株菌进行培养、收集、全菌蛋白提取，利用双向电泳技术，质谱鉴定和生物信息学三大技术比较分析△s19与s19蛋白质变化情况。 对两菌株的双向电泳图谱进行Image Master6.0软件分析和比较，结果发现：两菌株均约有650±10个蛋白点可被检测到，蛋白质差异表达量1.5倍以上的点63个。As19上调蛋白点35个，下调蛋白点27个。挑去差异明显的蛋白点：As19上11个蛋白点和s19上9个蛋白点进行MALDI-TOF-MS或/和MALDI-TOF/TOF-MS质谱鉴定、分析、其中相同的蛋白质4种，差异蛋白10种。 结果表明所鉴定的蛋白其功能主要与物质运输，代谢和毒力相关。
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