摘要
第一部份：绪论 综述了金纳米微粒的制备、表征及其在生化分析中的应用；综述了近年来共振散射技术在生化分析中的应用。介绍了青霉素G的分析进展。 第二部份：痕量青霉素的金纳米标记免疫共振散射光谱快速检测在pH8.0条件下，用粒径为9.0nm的金纳米微粒标记兔抗青霉素获得青霉素金标免疫探针。在pH5.4磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液及聚乙二醇存在下，金标记兔抗青霉素与青霉素G产生特异性结合，并生成胶体金免疫复合物。在PEG作用下胶体金免疫复合物发生聚集，导致体系在580nm处的共振散射峰增强。青霉素G浓度在7.5ng.mL-1-1.65×103 ng.mL-1范围内与580nm处的共振散射光强度增加值呈线性，方法的检出限为0.070ng.mL-1。该法用于定量分析牛奶中的青霉素，简便快速，结果令人满意。 第三部份：痕量青霉素G的免疫纳米金催化共振散射光谱检测小粒径的金、银和免疫纳米金粒子对氯金酸-盐酸羟胺这一反应具有较强的催化作用。基于金纳米微粒在580nm处的共振散射效应及免疫纳米金的催化作用，可用它做检测技术研究该纳米反应在生化分析中的应用。我们用粒径为9.0nm的金纳米微粒标记兔抗青霉素抗体。在pH5.4的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲溶液中，青霉素G与金标兔抗青霉素发生特异性结合生成胶体金免疫复合物，离心分离。以适量金标兔抗青霉素的上层清液做晶种，加入pH3.36盐酸-柠檬酸钠缓冲溶液、40μg.mL-1氯金酸和21.6μg.mL-1盐酸羟胺，利用金纳米粒子表面发生的自催化反应使晶种的粒径增大，在580nm处共振散射强度增强。随着青霉素G浓度C（0.15-225ng.mL-1）的增大，上层清液中免疫纳米金微粒数量降低，I580nm值随之降低。△I580nm与C成线性关系，其回归方程为△I580nm=0.28C+5.16,检出限为0.050ng.mL-1。该法用于牛奶中青霉素G的检测，结果较好，其回收率在101.6-120.3％之间。 第四部份：免疫纳米金催化Cu(II)-葡萄糖反应的共振散射光谱研究及其分析应用小粒径的金纳米粒子对酒石酸钾钠铜络合物-葡萄糖这一微粒反应具有较强的催化作用，其产物氧化亚铜-金复合纳米微粒在608 nm处存在较强的共振散射效应。将纳米金标记技术、共振散射光谱检测技术和纳米金催化作用有机地结合，可建立高灵敏、高选择性的生化分析新方法。用粒径为9.0nm的金纳米微粒标记兔抗青霉素G抗体（RAPG）可获得青霉素G（PG）的光谱探针（AuRAPG）。在pH5.2的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲溶液中，PG与AuRAPG发生特异性结合生成胶体金免疫复合物，离心分离。取适量上层清液做晶种，在0.010g.mL-1氢氧化钠-0.86mg.mL-1硫酸铜-0.080mg.mL-1的葡萄糖-水浴70℃条件下反应，反应形成粒径较大的氧化亚铜-金复合微粒，导致608nm处共振散射强度I608nm增强。随着PG浓度CPG（0.090-21.6 ng.mL-1）增大，上层清液中免疫纳米金微粒数量降低，I608nm值降低。△I608nm降低值与CPG成线性关系，其回归方程为△I608nm=3.86C+1.1,检出限为0.010ng.mL-1。该法用于牛奶中PG的检测，结果较好，其回收率在100.6-109.2％之间。
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