摘要
采用温室模拟早境胁迫-复水方法，以来自于国内外的14份新麦草（Psathyrostachys juncea）种质资源为研究材料，通过幼苗期温室盆栽试验，系统测定了干旱胁迫下新麦草种质材料苗期的叶片相对含水量、叶绿素、相对电导率、丙二醛和脯氨酸含量5个抗旱生理指标。全面分析了这些指标的变化规律，对这14份新麦草种质的抗旱性进行了综合评价，结果显示： 14份新麦草种质材料苗期随干旱胁迫时间延长，其叶片相对含水量、叶绿素含量、植株相对生长率均呈下降趋势，相对电导率、丙二醛含量与游离脯氨酸含量则有增加趋势，复水后均有不同程度的恢复。选取新麦草种质材料苗期干旱胁迫28d的叶片相对含水量、叶绿素含量、丙二醛含量、相对电导率、游离脯氨酸含量等指标，采用欧氏距离法进行综合聚类分析，可将15份新麦草种质材料的抗旱性划分为3个抗旱级别，即相对抗旱的材料包括XMC01、XMC06、XMC10、XMC11，中度抗旱的包括XMC02、XMC04、XMC08、XMC09、XMC12、XMC13，相对旱敏感的包括XMC3、XMC05、XMC07、XMC14。 为了深化新麦草种质资源遗传多样性及有利基因的发掘与研究，本人利用ISSR（简单重复间序列）标记对15份新麦草种质资源进行遗传多样性检测。为获得稳定的新麦草ISSR反应体系，对反应条件中的dNTP、Taq酶浓度、引物浓度、Mg2+浓度等因子进行了优化，建立的适合新麦草的ISSR-PCR最佳反应体系为：25μl的反应体系中含有dNTP2．5μl、Taq酶0．2μl、Primers1μl、Mg2+1．5μl、2．5μl10×buffer、2μl模板DNA和ddH2O15．3μl。反应扩增程序为：94℃预变性3min，94℃变性30s，46℃～60℃（退火温度因引物不同而不同）退火45s，72℃延伸1min30s，进行35个循环，最后72℃延伸10min。 ISSR标记结果表明，ISSR标记能够揭示材料间较高的遗传多样性。试验从25条引物中筛选出引物8条扩增条带较多、信号强、背景清晰的引物，通过这8个ISSR引物对15份新麦草材料进行扩增，共获得84个扩增位点，其中多态性位点72个，多态性比率（PPB）为85．7%。通过遗传相似系数（GS）的计算，供试材料间的GS值在0．4405～0．9048之间，说明其遗传分化程度较高，遗传多样性丰富，运用ISSR分子标记能够较好的揭示野生新麦草的遗传多样性及亲缘关系。通过UPGMA聚类分析，将15份新麦草分为四大类，组间遗传距离的差异是导致供试材料整体遗传差异较大的主要因素，而组内材料间亲缘关系较近，地理距离与遗传距离有一定的相关性。
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