摘要
植物茎端分生组织的两大功能即是其自身的维持与新器官的发生。位于分生组织中心的一群分裂缓慢的细胞是具有全能性的干细胞，分生组织边缘的干细胞不断分化.产生新的器官。我在对拟南芥插入激活突变体库的筛选过程中发现了一株植株矮化的突变体，通过对T-DNA插入位点的鉴定和分析，我发现在该突变体中T-DNA插在一个含有WUSCHEL相关同源异形结构域的转录因子WOX1(WUSCHEL HOMEOBOX1)基因的上游。该突变体的分生组织发育异常，茎尖显著小于野生型，并表现出矮化及多枝表型。突变体的叶片较小，呈深绿色，花药发育迟缓导致不育。我用35S增强子构建WOX1的过表达载体转入植物，转基因植物表现出与突变体类似的表型；而用WOX1的RNAi载体去转化突变体，可以使突变体回复到野生型表型。这说明突变体的表型确实是由于WOX1基因的过量表达引起，因此我把该突变体命名为wox1-D。 在wox1-D突变体中，干细胞标志基因CLV3在分生组织中的表达发生下调，并在根与下胚轴的连接处和侧根发生处发生异位表达，这表明WOX1的过量表达影响了CLV3的表达模式，从而导致矮化及多枝表型.此外，wox1-D突变体叶片的细胞明显小于野生型，检测发现在woxl-D中cyclinB1的表达强度明显低于野生型，这暗示WOX1在分生组织中表达模式的变化部分影响了细胞周期的顺利进行，阻滞了侧生器官的发育。 我通过酵母双杂交的方法寻找WOX1可能的相互作用蛋白。通过对拟南芥cDNA文库的筛选我找到了一个可能的靶蛋白SAMDC1,SAMDC1是多胺代谢过程中的一种关键酶。我通过MBP pull-down的方法在体外确认了WOX1与SAMDC1的相互作用。我的结果表明，WOX1参与分生组织的发育调控，这种调控可能是通过调节SAMDC的活性，进而影响多胺代谢，从而调节细胞的分裂活动实现；同时，多胺也有可能反过来调节茎端分生组织的发育。我通过逐步删除WOX1上各结构域的办法检测了WOX1与SAMDC1的结合位点，结果表明WOX1是通过其N端的同源结构域与SAMDC1结合并行使功能的。
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