辣椒转录因子CaSPL的克隆和功能研究

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中文摘要：辣椒(Capsicum annuum L.)是一种重要的蔬菜作物，辣椒生产的季节性较强，上市比较集中，旺季过后，供应量明显减少。如果能将供应期延长，对增加蔬菜的供应种类，满足市场需要具有重要的意义。利用遗传转化技术抑制成熟相关基因表达是提高辣椒储存时间的新途径。 SBP转录因子家族是植物所特有的一类转录因子，首先在金鱼草中分离得到，目前在拟南芥中发现该家族有16个成员，近年来己从几种植物中发现并分离出来，如：拟南芥、玉米、大豆、水稻、棉花、番茄等，这类转录因子在植物的生长发育等生理反应中发挥着重要的作用。本课题的研究是以辣椒成熟的表型特征和分子生物学特性为基础，重点对控制成熟表型的一个基因SPL进行研究。目前对辣椒中的这类基因研究还较少。我们以野生型辣椒为材料对辣椒CaSPL基因进行了研究，主要研究结果如下： ①在辣椒中克隆出LeSPL的同源基因并命名为CaSPL基因，NCBI GenBank登录号：EF141196。利用RT-PCR的方法在辣椒成熟果实的mRNA中扩增CaSPL基因，得到其cDNA序列，运用各种生物信息学的软件工具分析预测CaSPL基因序列所包含的生物功能信息。 ②以辣椒Actin基因的特异表达为参照，通过半定量RT-PCR分析，研究辣椒中 CaSPL基因在辣椒果实不同发育时期中的表达模式，结果表明该基因在绿熟期MG、破绿期B(Breaker)和成熟时期的果实中均有表达，其中以成熟时期的果实中表达量最高。 ③构建CaSPL基因的RNAi载体，利用农杆菌介导成功转化到AC++辣椒中，获得了2株抗性植株。 ④利用VIGS方法将CaSPL基因转到PVX病毒载体中，侵染绿熟期辣椒果实，22～25℃条件下生长25d～30d，通过观察转化辣椒株系果实成熟的表型特征变化以及RT-PCR分析，发现辣椒CaSPL基因有调控果实成熟的功能。

作者：

王炳琴

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关键词：

辣椒转录因子 CaSPL基因基因克隆遗传转化果实成熟

授予学位：

硕士

学科专业：

植物学

导师：

陈国平

学位年度：

2009

学位授予单位：

重庆大学

语种：

中文

中图分类号：