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农杆菌介导的几丁质酶基因及绿色荧光蛋白基因对油菜的转化研究

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作为世界上最重要的油料作物之一,油菜一直被育种专家视为最具研究价值的目的农作物。目前,全世界商业化种植的油菜中转基因品种已占到了31%。由于该作物在生长期间常受如菌核病等病害侵染,造成严重减产,故目前其转基因改造多集中在导入外源基因增强其对病害的抗性方面。 本研究使用目前普遍公认的在油菜转基因技术中最高效的农杆菌介导基因转化法,经过对培养基成分的优化探索和对下胚轴、子叶柄两种外植体的比较,得出了优化的油菜转化系统,成功将外源几丁质酶基因和报告基因gfp导入四个甘蓝型油菜品系。 本试验表明:发芽4天的子叶柄外植体无须经过预培养,立即在OD值为0.05(650nm)的农杆菌菌液中浸染30s,共培养2d后转入愈伤培养基。此方法较下胚轴外植体法更简便高效。确定了不同阶段使用的最适培养基配方及筛选转化体时卡那霉素浓度为50mg/L,总转化率达20.3%。

李阳冰

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油菜 农杆菌介导转化法 几丁质酶 绿色荧光蛋白 培养条件 转基因技术

硕士

生物学 植物学

谢小冬

2010

兰州大学

中文

S5