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富硒绿茶对小鼠部分免疫功能的影响

叶洪平

富硒绿茶对小鼠部分免疫功能的影响

叶洪平1
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  • 1. 三峡大学
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摘要

目的:观察富硒绿茶对于小鼠部分免疫功能的影响。 方法:以昆明系雄性小鼠为实验对象。每项实验随机分为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。对照组予煎煮茶叶时用的蒸馏水,其余各组小鼠均予茶叶汁灌胃。低剂量组20mg/20g.bw,中剂量组30mg/20g.bw,高剂量组40mg/20g.bw(茶叶汁浓度为0.1g/L,折合茶叶汁分别为0.2ml、0.3ml、0.4ml),含硒量(干重)分别为4.02μg、6.03μg、8.04μg,每天一次。1、腹腔巨噬细胞吞噬活力测定实验:分组灌胃8天后24小时内用PBS液无菌灌洗腹腔,采集腹腔巨噬细胞置于96孔板中,经过培育后置于酶标仪530nm处测定各孔的吸收度。2、溶血空斑实验:先分组灌胃6天,于第七天予每只小鼠腹腔注射0.2ml 2%(v/v)鸡红细胞悬液,继续灌胃。灌胃满10天后24小时内无菌取脾,制作脾细胞悬液,再与10%鸡红细胞悬液混匀并倾倒于已刷有薄层琼脂糖的玻片上凝固,培育1.5小时后加入适量补体再培育1.5小时,计数玻片上的溶血空斑数。3、ConA 诱导小鼠脾淋巴细胞转化实验:分组灌胃30天后24小时内无菌取脾,制作浓度为3×106个/ml 脾细胞悬液。将每孔1ml细胞悬液加入12孔培养板,再加入75μlConA液,培育68小时后再加入MTT(5mg/ml)50μl/孔,继续培育4小时。出培育箱后每孔加入1ml酸性异丙醇,使紫色结晶完全溶解后,将溶液移入96孔培养板中置于酶标仪570nm处测定吸收度。4、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验:分组灌胃30天后24小时内每只小鼠腹腔注射1ml 20%(v/v)的鸡红细胞悬液,30分钟后处死小鼠并剪开腹腔灌入2ml生理盐水,保留1分钟后吸出1ml平均分滴于2片载玻片上,置于培养箱中培育30分钟,固定、染色后在光镜下计数已经吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数量和被吞噬的鸡红细胞总数,然后计算吞噬百分率和吞噬指数。 结果:1、腹腔巨噬细胞吞噬活力测定实验显示:低剂量组、中剂量组、高剂量组与对照组相比较吞噬能力均有显著提高(低、中剂量组与对照组比较,p<0.01,高剂量组与对照组比较,p<0.001)。2、溶血空斑实验显示:低剂量组、中剂量组、高剂量组与对照组相比较,抗体生成能力均有显著提高(低剂量组与对照组比较,p<0.05,中、高剂量组与对照组比较,p<0.001)。3、ConA 诱导小鼠脾淋巴细胞转化实验显示:低剂量组、中剂量组与对照组相比较,有显著差异性(低剂量组与对照组比较,P<0.05,中剂量组与对照组比较,P<0.01);高剂量组与对照组相比较无差异性(P﹥0.05)。4、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验显示:吞噬百分率和吞噬指数低、中剂量组和对照组相比较有显著差异性(低剂量组与对照组比较,P<0.05,中剂量组与对照组比较,P<0.01);高剂量组与对照组相比较无显著差异性(P﹥0.05)。 结论:富硒绿茶低、中剂量均能够显著提高小鼠的免疫功能。但是,高剂量短期内(灌胃10天)可以增强免疫功能,但长期使用(灌胃30天)却不能增强免疫功能,可能与其显著抑制小鼠体重增长有关。

关键词

富硒绿茶/免疫功能/药理作用

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授予学位

硕士

学科专业

药理学

导师

陈超

学位年度

2010

学位授予单位

三峡大学

语种

中文

中图分类号

R2
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