摘要
目的: 1、观察体外培养少突胶质细胞的增殖和分化，观察其生物学特性；探讨获得细胞纯度较高的实验方法，为少突胶质细胞损伤后髓鞘形成障碍或脱髓鞘疾病的研究奠定基础。 2、建立体外少突胶质细胞缺氧培养模型。 方法: 1、取新生SD大鼠脑皮质进行体外培养，根据星形胶质细胞和少突胶质细胞生长时间差异、细胞生长方式及细胞对培养层粘附等特性的不同，采用两次恒温摇床振荡分离纯化法和条件限定培养基培养，倒置显微镜结合免疫荧光染色法鉴定细胞种类并判断纯度。 2、缺氧联合低糖培养建立细胞体外缺氧培养模型，透射电镜观察细胞超微结构。 结果: 1、获取高纯度的大鼠少突胶质细胞。少突胶质前体细胞祖细胞A285阳性，成熟少突胶质细胞半乳糖脑苷脂阳性。 2、缺氧培养2小时细胞变化不明显，但缺氧培养6小时，细胞存活率明显下降，并且随着缺氧时间延长存活细胞更少，凋亡细胞更多，至缺氧培养10小时，大多数细胞破碎。 结论: 1、两次恒温摇床振荡分离纯化法和条件限定培养基培养可获取高纯度的大鼠少突胶质细胞。 2、低糖联合缺氧培养模型可以建立可行的少突胶质细胞体外缺氧模型。
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