摘要
目的:探讨多种表观遗传学相关基因在人皮肤成纤维细胞自然衰老和氧化应激诱导衰老过程中的表达差异及意义。 方法:提取年轻组(16岁以下)及衰老组(55岁以上)人皮肤成纤维细胞中总RNA(自然衰老模型)及亚致死量H202处理诱导衰老组与未处理年轻对照组人皮肤成纤维细胞总RNA(氧化应激诱导衰老模型),分别通过逆转录合成cDNA,利用倍比稀释法建立表观遗传性相关催化酶基因EZH2、Bmi-1、JMJD3、DNMT1、MLL1和内参基因β-actin的标准曲线,选用10-4浓度梯度进行实时荧光定量PCR检测其基因表达水平的差异。 结果:在各实验组中,PCR产物的浓度在(1.0×10-2)~(1.0×10-7)范围时,上述目的基因与内参基因均得到一条平滑的扩增曲线,模板浓度与可检测的荧光信号的循环数之间呈负相关。在自然衰老模型和氧化应激诱导衰老模型中,衰老组的EZH2、Bmi-1及DNMT1基因表达水平要显著低于年轻组(P<0.05),JMJD3、MLL1无明显差异(P>0.05)。 结论: EZH2、Bmi-1及DNMT1基因在人皮肤成纤维细胞衰老过程中含量逐渐下降,在皮肤成纤维细胞衰老过程中起到重要的作用。