紫花苜蓿BADH基因导入与耐盐变异系的生理鉴定

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中文摘要：以耐高温高湿的“维多利亚”、“盛世”和“CW787”3个紫花苜蓿（Medicagosativa L）品种的高频再生体系筛选所得耐盐株系和正常愈伤生长所得植株为材料，在0％、0.2％、0.4％、0.6％、0.8％和1.0％NaCl溶液胁迫下，通过丙二醛（MDA）、脯氨酸（PRO）、可溶性蛋白（SP）和可溶性糖含量（SS），以及超氧化物歧化酶（SOD）活性等生理生化指标的定量分析及综合评价，对耐盐变异系的耐盐性进行了鉴定。并利用农杆菌介导法转化BADH（甜菜碱醛脱氢酶）基因，建立一套农杆菌介导苜蓿基因转化的优化体系。研究选育出的抗盐碱苜蓿品系，可为盐碱地开发提供植物种质资料。主要结果如下： 1）苜蓿耐盐突变体材料的丙二醛、脯氨酸、可溶性蛋白和可溶性糖含量，以及SOD活性均显著（р<0.05）或极显著（р<0.01）高于未经筛选的对照植株。 2）随NaCl溶液浓度升高，耐盐变异系苜蓿材料的脯氨酸和可溶性蛋白含量均呈增加变化，丙二醛（MDA）含量均呈先降后升变化；可溶性糖含量和SOD活性则均呈先升后降变化，变化曲线中多以0.8％的盐浓度为转折点。 3）耐盐变异系苜蓿品种耐盐性综合指数为：“盛世”>“CW787”>“维多利亚”。 4）以培养7d的甘农4号和盛世紫花苜蓿的无菌苗下胚轴为外植体，农杆菌菌株为介体，得到优化苜蓿基因转化体系。当头孢霉素为200mg/L时，对农杆菌的抑菌效果较好；Kan筛选浓度为：盛世40mg/L、甘农4号50mg/L。采用下胚轴为试验对象；菌液OD600在0.3-0.5下，侵染时间10min；经筛选，获得10株抗Kan的甘农4号转化植株，其中1株经PCR检测呈阳性。由此说明BADH基因在转化植株中得到了良好表达。

作者：

王珺

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关键词：

生理生化指标紫花苜蓿 BADH基因耐盐变异系生理鉴定

授予学位：

硕士

学科专业：

草业科学

导师：

柳小妮

学位年度：

2010

学位授予单位：

甘肃农业大学

语种：

中文

中图分类号：