摘要
目的：揭示抗癌活性肽(ACBP)对人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响,并进一步探讨抗癌活性肽是否通过线粒体途径影响结肠癌细胞凋亡。 方法：将不同浓度的ACBP作用于体外培养的人结肠癌HT-29细胞,采用MTT比色法检测不同浓度的抗癌活性肽(ACBP-L和ACBP-NL)对人结肠癌HT-29细胞生长增殖的抑制作用；利用细胞HE染色检测细胞凋亡的形态学变化；使用流式细胞仪检测抗癌活性肽(ACBP)对人结肠癌HT-29细胞的凋亡；应用RT-PCR检测凋亡相关因子Bcl-2、Bax的表达。 结果:①MTT结果表明不同浓度(10μg/ml、15μg/ml、20μg/ml、25μg/ml)抗癌活性肽(ACBP-L和ACBP-NL)对人结肠癌HT-29细胞生长增殖具有抑制作用,并呈剂量和时间依赖性。抗癌活性肽(ACBP-NL)作用24h、48h、72h,半数有效抑制浓度(IC50)值分别为:30.3μg/ml,25.9μg/ml,21.2μg/ml；抗癌活性肽(ACBP-L)作用24h、48h、72h,IC50值分别为:24.6μg/ml,22.5μg/ml,17.6μg/ml。②细胞HE染色显示:使用72h的IC50浓度抗癌活性肽(ACBP-L和ACBP-NL)处理细胞72h后,细胞形态出现明显的凋亡特征,如染色质浓缩、凋亡小体等。③流式细胞仪检测发现,采用72h的IC50浓度抗癌活性肽(ACBP-L和ACBP-NL)经过72h处理后,细胞发生的凋亡率较阴性对照组升高。④使用72h的IC50浓度抗癌活性肽(ACBP-L和ACBP-NL)处理细胞72h后,经RT-PCR检测发现,凋亡相关因子Bcl-2表达下降、Bax表达增加。 结论：①抗癌活性肽(ACBP-L和ACBP-NL)对人结肠癌HT-29细胞有显著的生长增殖抑制作用,并具有剂量和时间依赖性；②抗癌活性肽(ACBP-L和ACBP-NL)具有诱导人结肠癌HT-29细胞发生凋亡的作用,其机制与促进Bax的活化、下调Bcl-2的表达,激活细胞凋亡的线粒体途径有关。
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