摘要
油菜菌核病是一种世界性病害，在五大洲的100多个国家皆有发生，其地理分布极为广泛。它是由核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)引起的一种真菌病害。在中国，油菜菌核病居油菜三大病害之首，一般发病率为10%～30%，严重时可以达到80%以上。在长江中、下游及东南沿海一些主要的油菜产区，包括江苏、安徽、上海、湖南、浙江、江西、湖北等地病害的发生尤为突出，严重影响了我国的油菜生产。 本实验从千年古银杏树、茶树以及红豆树的根、茎、叶内分离内生真菌和根际土壤中分离真菌，筛选出对油菜菌核病有拮抗作用的生防真菌；通过室内拮抗、孢子萌发等试验及定殖、钵栽、田间防病实验，探明拮抗真菌对油菜菌核病的生防潜能，取得以下研究结果。 1、生防真菌的分离、筛选和鉴定 对从四川省雅安市采集的银杏树、茶树以及红豆树等3种植物的根、茎、叶内生真菌和根际土壤种分离真菌，共分离得到内生真菌73株、根际土壤真菌29株；通过对油菜菌核病菌的拮抗试验，筛选出有较强拮抗作用的红豆树内生真菌1株。通过形态鉴定，将该内生真菌鉴定为绿色木霉（Tichoderma viride）。 2、绿色木霉（T. vir ide）对油菜菌核病菌的拮抗作用和对子囊孢子萌发的影响 利用绿色木霉（T. viride，HJZ3）菌株的发酵液抑制油菜菌核病菌菌丝生长的实验，测定抑制率达到90%以上；采用发酵液浸泡菌核和发酵液加入PDA平板两种试验方法，测定HJZ3对油菜菌核萌发的抑制率，发酵液稀释2倍时，对油菜菌核病菌菌核萌的抑制率分别为66%，60%；在稀释5倍时，对菌核萌发的抑制作用相比较稀释2倍时有所下降，抑菌率分别降低为30%，34%。HJZ3发酵液在稀释2倍，5倍，10倍时，菌核病菌子囊孢子的萌发率分别为58.3%，85.8%，90.4%，HJZ3菌株在稀释2倍，5倍，10倍时孢子的萌发率分别为6.9%，23.1%，53.6%。 3、绿色木霉（T. viride）在油菜体内的定殖 通过药物链霉素标记绿色木霉（T. viride），在油菜植株根际土壤及油菜植株体内的定殖能力进行测定。试验结果证明：HJZ3能够较好的在油菜植株根际及体内定殖，菌株直接灌根处理接种后的第3d，在苗根部分离到的菌量达204cfu/mg，显著高于茎和叶，说明菌株易进入油菜苗体内。并且于接菌后3、5、8、11、15d随机取5株油菜苗进行标记菌的分离，试验证明，标记的HJZ3菌株可在油菜根际土中及其定殖。 4、绿色木霉（T. viride）对油菜的生长的影响 拮抗菌液浸种对油菜种子的出苗率、植株生长有显著的促进作用。其中，接种的种子出苗率较未接种的对照提高了2.29(P＜0.05)，并且出苗整齐、迅速；植株株高、干物质重量均明显高于清水对照，差异达到了显著水平(P＜0.05)或极显著水平(P＜0.01)。 5、绿色木霉( T. viride)对油菜菌核病的室内及田间控病效果 进行室内盆栽试验，对照病斑大小为23.4mm，供试的两种化学药剂及生防菌液的处理病斑大小均在5～10mm之间，对比试验结果，筛选出的拮抗真菌对油菜菌核病确实有明显的抑制作用；在田间试验中，统计油菜菌核病的田间病株率，对照高达94.2%，两种化学药剂及生防菌液的处理均在50%～60%之间，对照的病情指数为71.7%，生防菌液为17.5%.两种化学药剂和生防菌液的田间防效均在65%～70%，但是生防菌液处理与之前室内盆栽试验的抗病效果有了一定的差异，这可能与复杂多变的自然环境的影响有关，导致拮抗菌在油菜植株体内的定殖能力受到影响。
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