葛银口服液抗肉鸽热应激作用机制初探及葛根素代谢动力学测定

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中文摘要：本研究以肉鸽为试验动物建立了具有实践指导意义的热应激模型.在此基础上，研究中药葛银口服液对热应激肉鸽的保护机理及其血浆药代动力学特点。试验包括研究葛银口服液对血液酶指标和热休克蛋白70 mRNA表达量的影响；比较分析了单味葛根和葛银口服液中葛根素在鸽子体内的血浆药代动力学特点。葛银口服液对热应激肉鸽血液酶活性的影响中药可以缓解热应激的不良影响，改善血液生化水平。本试验研究了葛银口服液对热应激肉鸽血清中的谷丙转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、肌酸肌酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）的影响。结果表明，高温应激后，模型组肉鸽的ALT、CK和LDH高于常温对照组，但是高温用药组的含量要低于模型组。高温模型组中ALP比常温对照组要低，高温用药组含量比模型组要略高些，但对其影响不大，说明葛银口服液对热应激肉鸽ALP的调节作用不明显. 葛银口服液对热应激肉鸽HSP70 mRNA表达量的影响热休克蛋白是一种可使细胞非特异性损伤能力得到增强的保护性蛋白。本试验研究了葛银口服液对热应激肉鸽热休克蛋白70mRNA表达量的影响。首先，从组织中提取总RNA，将扩增产物进行测序、比对，测得的rg-576hsp70基因序列与日本鹌鹑HSP70（AB262971.1）序列比对，同源性为92％；与珍珠鸡HSP70序列（AB096696.1）具有93％的同源性，证明RT-PCR产物的电泳条带就是我们寻找的目的片段。在此基础上，利用荧光定量PCR检测肉鸽心脏和肝脏中HSP70 mRNA表达量。结果表明，高温用药组肉鸽心脏、肝脏中的HSP70 mRNA含量显著高于高温模型组，表明中药复方可以诱导肉鸽组织中HSP70mRNA表达量的增加，从而增强了肉鸽对高温的耐受性。葛根素在肉鸽体内的代谢动力学特点建立HPLC法测定单味葛根煎剂和葛银口服液中葛根素在肉鸽体内的24小时血药浓度，通过药动学参数变化来评价药效的作用。色谱条件流动相为甲醇-0.1％醋酸水（27:73），流速1.0 ml·min-1，检测波长250nm，柱温为25℃，并用3P87程序拟合药动学参数。结果发现单味葛根和葛银口服液灌胃15min后即可检出血浆中的葛根素，最高血药浓度出现在1.5-4小时.试验结果表明，葛根素代谢在肉鸽体内符合二室开放模型分布，单味葛根和葛银口服液中的葛根素在肉鸽体内都呈现吸收快、消除慢的特点；相比之下，葛银口服液中的葛根素药物分布半衰期t1/2α变长，消除半衰期t1/2β变短，最高血药浓度的时间tmax提前，最高血药浓度cmax变大，表明了葛银口服液中的葛根素在肉鸽体内的代谢速度加快，吸收强度增强。

作者：

刘萍

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关键词：

葛银口服液热应激肉鸽保护机理血浆药代动力学特点

授予学位：

硕士

学科专业：

临床兽医学

导师：

戴鼎震、胡元亮

学位年度：

2009

学位授予单位：

南京农业大学

语种：

中文

中图分类号：