摘要
背景：一些研究者利用超顺磁性氧化铁对血管内皮祖细胞进行标记，但是，对于超顺磁性氧化铁标记血管内皮祖细胞后，对其存活、增殖及凋亡是否有影响研究较少。 目的：研究大鼠骨髓内皮祖细胞 (endotheliAlprogenitor cells，EPCS)的分离、培养、SPIO 标记，SPIO对EPCS的标记效果及其对细胞存活、增殖以及凋亡的影响，为进一步实验研究奠定基础。 方法：SD大鼠体重120g～150g，采用梯度密度离心法和贴壁法获取大鼠EPCS，采用25μg／mL SPIO对其标记，比较标记和未标记的EPCS：普鲁士蓝染色观察铁标记率；台盼蓝检测细胞活力；MTT 法检测细胞增殖活力；Calcein-AM／PI 染色检测细胞活性及细胞膜完整性；AO／PI 染色检测细胞凋亡率。 结果与结论：分离培养EPCS7～10d，细胞集落相互连接，呈典型的铺路石样外观。普鲁士兰染色显示SPIO（25μg/mL，24 h）对细胞的标记率接近94％；比较SPIO 标记及未标记的EPCS：细胞活力分别为94.34%±0.25%和95.33%±0.31%；MTT 法检测两组间相比差异无统计意学义(P>0.05)；Calcein-AM/PI 染色检测细胞的活性和膜完整性，存活率分别为96％和97％；AO/PI 染色两组细胞的凋亡率均为5％。采用梯度离心法从骨髓中分离单个核细胞，经诱导培养可实现内皮祖细胞的分离培养；25μg/mL浓度的SPIO细胞标记率高，对细胞毒性小，且不影响EPCS的活力、增殖及凋亡。
NETL