摘要
目的：本实验首先建立兔急性心肌梗死模型，主要探讨术后白藜三醇慢性给药对兔心肌梗死后新生血管的诱导作用及可能机制。 方法：32只新西兰白兔为实验对象，随机分为假手术组、手术对照组、消心痛组、白藜三醇组，每组8只。假手术组中LAD仅穿线不结扎，其余兔通过结扎LAD建立心肌梗死模型。术后分别给予不同的药物干预：假手术组及手术对照组予7%酒精3ml，白藜三醇组予白藜三醇3mg/kg（溶于7%酒精3ml），消心痛组予消心痛2.4mg/kg（溶于7%酒精3ml），均灌胃，1次/天。两周后，分别取各组存活兔心肌梗死区、非梗死区、梗死边缘区心肌组织标本。HE染色、Masson染色法分别观察梗死区、非梗死区心肌组织形态学变化并采集图像，应用Image pro plus6.0图像分析系统计算各组心肌梗死面积；应用免疫组化染色法检测各组梗死边缘区CD34、IGF-1、bFGF的表达，并以CD34标记血管内皮，在显微镜400×视野下，计数MVD； Western-blot法检测各组梗死边缘区IGF-1、bFGF蛋白表达水平；RT-PCR检测各组梗死边缘区VEGFmRNA表达水平。 结果：1一般情况：32只兔成功制备心梗模型并存活至治疗结束的有27只，总存活率为84.4%。术中及术后共有5只兔死亡：术中1只死于气胸，1只死于术后6小时内，1只死于术后感染（消心痛组）、2只死于心衰恶病质（手术对照组及白藜三醇组各1只）。 2光镜结果：①HE染色结果显示假手术组心肌细胞横纹及闰盘清晰，纤维结构清楚、排列整齐、无炎性细胞浸润。未梗死部位的心肌细胞排列整齐紧密，肌纤维走向明晰，细胞分界清楚，胞核椭圆形位于中央，胞质呈嗜酸性均匀染色，而梗死区室壁变薄，外膜至内膜间心肌纤维数量减少，肉芽组织、纤维组织和脂肪组织增生明显，各种细胞排列紊乱，少量散在的心肌细胞。②Masson染色结果示梗死部位纤维结缔组织呈蓝色，正常心肌纤维呈紫红色或深红色。 3心肌梗死面积测算结果：白藜三醇组、消心痛组梗死面积明显小于手术对照组(P＜0.05)，白藜三醇组与消心痛组之间比较无统计学意义。 4免疫组化染色测定各组心肌梗死边缘区MVD、IGF-1、bFGF结果：CD34、IGF-1、bFGF三者阳性表达在显微镜下呈黄褐色。白藜三醇组、消心痛组较假手术组、手术对照组能明显增加MVD及IGF-1、bFGF的表达(P＜0.05)；手术对照组较假手术组MVD、IGF-1表达增加(P＜0.05)，但bFGF表达两组之间无明显变化(P＞0.05)；白藜三醇组IGF-1的表达水平较消心痛组明显增加(P＜0.05)，MVD、bFGF两组之间无统计学差异(P＞0.05)。 5 Western-Blot测定各组心肌梗死边缘区IGF-1、bFGF结果：白藜三醇组、消心痛组较假手术组、手术对照组能明显增加IGF-1、bFGF的表达（P＜0.05）；手术对照组较假手术组、白藜三醇组较消心痛组IGF-1表达均增加(P＜0.05)，但手术对照组较假手术组、白藜三醇组较消心痛组bFGF表达无明显变化(P＞0.05)。 6 RT-PCR测定各组心肌梗死边缘区VEGF-AmRNA表达水平：白藜三醇组、消心痛组同假手术组、手术对照组比较明显增加(P＜0.05)，手术对照组较假手术组明显增加(P＜0.05)，差异均有统计学意义；白藜三醇组与消心痛组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。 7相关分析结果：四组兔心肌梗死边缘区IGF-1、bFGF免疫组化结果与MVD均成正相关（r=0.913，P＜0.01；r=0.969，P＜0.01）；MIS与MVD成负相关(r=-0.551,P＜0.05)。 结论：1.在缺血缺氧环境下，机体可启动心肌梗死边缘区的血管生成，但作用强度有限。 2.白藜三醇与消心痛均可促进心肌梗死后边缘区血管生成，有利于冠脉侧枝循环的建立，减小心梗面积。 3.白藜三醇诱导血管发生与多种血管生长因子表达增多相关，且其作用机制与消心痛不完全相同，其中介导IGF-1高表达可能是其重要作用机制之一。
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