摘要
近年来，肾脏疾病已经成为一个威胁世界公共健康的主要疾病之一，其发病率逐年增加，由于肾脏疾病在患病早期并无可察觉的临床症状，因此肾脏疾病已成为全球最可怕的“隐形杀手”之一。早期诊断是实现肾脏疾病早期治疗的关键，在肾脏疾病的发生早期，可以通过尿液中生物标志物蛋白含量的检测确定疾病发生的部位及程度。 视黄醇结合蛋白(Retinol Binding Protein，RBP)是存在于血液中的一种低分子量蛋白，分子量为22kDa。大量研究表明，其排泄量增加能敏感的反映肾小管损害的程度。血液中游离的RBP经肾小球滤过，再由近曲小管上皮细胞重吸收降解[1，2]，仅有少量RBP被排泄到人的终末尿中，因此正常人尿液中RBP含量极低[3]。近曲小管病变会导致重吸收功能下降，从而引起尿液中RBP含量上升（高于正常人5-10倍以上），加之RBP蛋白在尿液中性质稳定，故RBP被认为是肾小管损伤的一个良好的早期标志物，对RBP的检测己被广泛应用于临床[4-7]。 目前临床检测尿RBP的方法较多，常用的如免疫比浊法、酶联免疫吸附法等，但是这些方法均存在一定的缺陷，比如获得结果时间较长，操作较为复杂，对实验设备、人员要求较高，检测成本较大等缺点。由于肾脏疾病具有早期发现难的特点，因此急需一种方便快捷成本低廉的检测手段便于大规模早期筛查及家庭自检。 本研究采用DNA疫苗免疫[8，9]，天然纯化人RBP蛋白筛选的方法获得了两株高亲和力特异性识别人RBP蛋白的单克隆抗体，并以胶体金免疫层析技术为平台，开发出基于双抗体夹心法的定性检测尿RBP的胶体金诊断试纸。该产品使用方便，成本低廉，5分钟即可快速直观地判读结果，弥补了目前RBP诊断产品的不足，有希望用于临床体检等大规模筛查及病人家庭自检，具有良好的实际应用前景。该产品根据实际临床数据，成功将检测临界值设定为300ng/ml，即当尿样中RBP含量大于等于300ng/ml时产品显阳性结果，低于300ng/ml时显阴性结果。该产品己在上海市第一人民医院完成临床试验。试验显示，本产品与临床使用的ELISA诊断产品（上海太阳生物技术有限公司）相比，在检测180份样本中，敏感性为100%，特异性为94.9%，符合率为96.7%，x2检验P=0.3901，证明本产品与临床ELISA产品的检测结果无显著差异。目前，该产品已申请专利保护，产品的注册申报正在进行中，有望在近期通过药监局批准注册上市。
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