摘要
鳗弧菌(Vibrio Anguillarum)引起的弧菌病是造成我国北方鱼类养殖业严重经济损失的主要病原菌之一。近年来，由于过量而频繁地使用抗生素等化学药物，导致耐药性病原菌快速蔓延，并对环境造成严重的负面影响。鱼用疫苗作为一种新型的免疫防治手段已经受到了越来越多的关注，其中减毒活疫苗是非常有代表性的一种疫苗类型，关于其效力和安全评价的问题是目前研究的主要方向。 本课题以实验室前期构建的营养缺陷型鳗弧菌减毒活疫苗候选株为基础，对其应用过程中的生物安全性进行了初步评价，确定了对宿主及环境安全的应用剂量；同时以模式生物斑马鱼作为模型，考察几种鳗弧菌减毒活疫苗对斑马鱼的免疫保护力，并考察了宿主免疫系统对减毒活疫苗的响应。 研究结果表明，鳗弧菌系列活疫苗株在模拟自然水体环境以及斑马鱼为模型的鱼体环境中，当菌体浓度为106cfu／ml时，菌体不能在水体或斑马鱼鱼体内长期生存，最终在一周内全部死亡；以斑马鱼为模式生物，对其半致死量进行测定，发现相对于鳗弧菌野生株，疫苗候选株减毒了约1000倍；通过不同的给药方式对疫苗候选株免疫保护力测定表明，浸泡给药方式和注射给药方式具有相当的保护效果。对使用减毒活疫苗浸泡免疫后斑马鱼免疫相关基因表达量分析发现，疫苗进入鱼体后会造成鱼体中特异性和非特异性免疫相关基因在不同组织中不同程度的上调，说明鳗弧菌减毒活疫苗能够激发斑马鱼非特异性及特异性免疫应答，从而实现免疫保护。
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