摘要
目的： 癫痫(EP)是由多种病因引起的临床常见疾病,随着神经解剖、电生理生化及遗传等学科的发展,越来越多的人认为自身免疫机制可能在癫痫发病中起到一定作用。调节性T(Treg)细胞是抑制性T细胞的一种功能亚群,通过抑制其他免疫效应细胞的功能发挥免疫抑制活性,调节机体免疫反应,它与白细胞介素-2(IL-2)关系非常密切。癫痫患儿体内存在IL-2浓度的异常,推测癫痫患儿外周血中Treg细胞也可能存在异常。本文研究CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞在癫痫患儿外周血中的表达水平,探讨其在癫痫发病机制中的作用。 材料和方法： 一研究对象 (一)实验组 2010年3月至2010年12月在我院小儿神经内科病房住院或门诊就诊的患儿。根据入选标准和剔除标准入选的患儿共41例,分两组:A组(年龄＞1岁)29例,其中男16例,女13例,平均5.59±2.61岁;B组(年龄1月～1岁)12例,其中男8例,女4例,平均0.39±0.19岁。根据1989年国际抗癫痫联盟(ILAE)制定的癫痫发作的分类方案,全部病例均为强直-阵挛发作。 (二)正常对照组 同期门诊体检的健康儿童38例,分两组:C组(年龄＞1岁)30例,其中男20例,女10例,年龄3.54±2.65岁;D组(年龄1月～1岁)8例,其中男4例,女4例,年龄0.48±0.38岁。癫痫组与对照组问性别、年龄无统计学差异。 二、标本采集 癫痫组患儿于入院24小时内取空腹静脉血2ml,对照组健康儿童取空腹静脉血2ml,经肝素抗凝后待用。 三、主要仪器和试剂 FACSCalibur流式细胞仪、高温低速离心机、震荡仪、加样枪、超净工作台;人调节性T细胞染色试剂盒(eBioscience公司)、溶血素、淋巴细胞分离液。 四、方法 (一)Treg细胞比例的测定 (1)外周血单核细胞(PBMCs)的提取 (2)T调节细胞的染色 (3)上流式细胞仪分析 (二)淋巴细胞亚群及免疫球蛋白的测定 按照说明书,用流式细胞术测定淋巴细胞亚群,用免疫速率散射比浊法测定免疫球蛋白。 实验结果： 1、与对照组相比,年龄＞1岁的癫痫组外周血中Treg细胞比例、CD4+T细胞比例、CD4+/CD8+比值、免疫球蛋白A浓度显著降低,CD8+T细胞比例、自然杀伤(NK)细胞比例、B淋巴细胞比例显著升高。 2、与对照组相比,年龄1月～1岁的癫痫组外周血中Treg细胞比例、CD4+/CD8+比值、免疫球蛋白A浓度显著降低,CD8+T细胞比例升高。 3、1月～1岁组患儿外周血中免疫球蛋白A浓度、免疫球蛋白G浓度较＞1岁组显著降低,其余免疫指标两组间比较差异无统计学差异。 结论： 1、癫痫患儿外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞比例显著降低,免疫抑制活性减弱,使CD8+T细胞、NK细胞增生活跃,抑制CD4+T细胞活化。 2、癫痫患儿体内CD4+T细胞和CD8+T细胞比例失调,细胞毒性T细胞功能上调,辅助性T细胞功能抑制,造成机体免疫稳态失衡。 3、不同年龄癫痫患儿外周调节性T细胞比例未见明显差异,可能与患儿体内异常免疫调节抑制了其正常的生理分泌有关。 4、癫痫患儿外周血中调节性T细胞的比例异常,可能参与癫痫的发生和发展。
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