摘要
HAART(高效抗逆转录病毒治疗)是针对HIV感染采用一系列抗病毒药物的组合的一种治疗方法,然而抗病毒药物无法作用于HIV-1潜伏感染的病毒,一旦治疗中止,HIV-1病毒出现反弹,因此HIV-1潜伏感染是HAARY治疗的主要障碍。HIV-1转录调控对HIV-1潜伏感染起重要作用,如何激活潜伏的HIV-1转录并利用HAART治愈艾滋病是当今HIV-1治疗领域的热点。本实验室前期已报道HMBA和Prostratin两种药物联合使用可显著协同激活HIV-1转录,这种作用是通过有效促进转录因子NF-κB的募集来实现的。然而,HMBA和Prostratin两种信号如何促进NF-κB募集以及NF-κB在HIV-1转录中的具体调控机制仍然未知。本文以稳定整合HIV-1 LTR Luciferase reporter gene的HeLa细胞为模型,通过免疫荧光,Western Blot,qRT-PCR,ChIP等一系列实验进行研究,旨在解决上述问题。 我们的研究结果表明:HMBA可通过持续促进IκBα的蛋白酶体降解来协助Prostratin促进转录因子NF-κB在HIV-1 LTR启动子区的募集,而NF-κB对于HIV-1核小体Nuc-1的打开是必须的,说明NF-κB在HIV-1染色体重塑过程中起重要作用,研究结果还排除了组蛋白H3乙酰化对于染色体重塑的作用,并发现NF-κB的转录激活结构域可促进抑制性的组蛋白H1从染色体上解离,很可能NF-κB通过此结构域结合某个未知的细胞周期蛋白激酶来促进H1的解离从而影响核小体致密度。 综上,我们初步确定了HMBA和Prostratin两种信号协同调控NF-κB的分子机制,并首次发现NF-κB可能参与信号诱导的组蛋白H1的解离以及核小体Nucl的打开,从而在染色体重塑中起重要作用,这些结果为NF-κB调控HIV-1转录这一领域提供了新的机制。
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