摘要
DNA甲基化是已知最早被发现的与基因抑制相关的表观遗传机制。DNA的甲基化修饰参与基因表达调控、胚胎发育、细胞分化、基因组印迹、X染色体灭活和细胞记忆等诸多重要生物学过程。通常情况下，甲基化水平同基因表达呈负相关，甲基化程度越高，基因表达活性越低，甲基化程度越低，基因表达越活跃。DNA异常甲基化可能导致基因的不稳定性和疾病的发生。硒作为一种人和动物必需微量元素，其含量高低也与DNA甲基化异常改变相关。有实验证明，饮食中硒的缺乏导致小鼠Caco-2细胞系及肝和结肠组织的低甲基化。饲料硒含量对于禽类组织DNA甲基化的影响还未见报道。 本试验通过饲喂低硒日粮建立缺硒鸡模型，应用高效液相色谱法检测硒缺乏时鸡组织中DNA甲基化水平的改变情况，采用实时荧光定量PCR方法检测硒缺乏对鸡组织中甲基转移酶和去甲基化酶基因表达的影响，结果表明： 1建立了鸡组织中DNA甲基化水平的高效液相色谱检测方法，优化色谱条件如下：色谱柱为DIKMA SpursilC18-EP(250 mm×4.6 mm5μm).紫外检测波长280 nm；流动相为0.05moL/L磷酸二氢钾，磷酸调pH至3.5；流速为1mL/min，上样量20μL。 2低硒日粮组鸡肌肉组织、脑组织、免疫组织及肝脏中DNA总甲基化水平与对照组比较整体呈降低趋势。 3低硒日粮组鸡甲基转移酶DNMT1、DNMT3A、DNMT3B基因mRNA表达水平呈降低趋势。 4低硒日粮组鸡肌肉组织、脑组织、免疫组织及肝脏中去甲基化酶MBD2基因mRNA表达呈升高趋势。
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