摘要
目的：在体外初步探讨峨参提取物对人非小细胞肺癌A549和H460细胞增殖的抑制作用，为峨参提取物治疗非小细胞肺癌提供理论和实验依据。在体内从峨参石油醚提取物及水煎剂对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤重量、体积、形态学变化及bax、bcl-2等因子的表达等各方面综合分析峨参石油醚提取物及水煎剂对H22荷瘤小鼠的影响，旨在为峨参应用于肿瘤的临床治疗提供理论依据。 方法：(1)以A549和H460细胞为细胞模型，采用MTT法检测不同浓度不同时间点(24小时、48小时)峨参提取物对A549和H460细胞增殖的抑制作用，计算峨参石油醚提取物对肺癌细胞生长的抑制率与半数抑制浓度IC50。(2)采用DAPI染色法、琼脂糖凝胶电泳法(DNA ladder法)检测峨参石油醚提取物对非小细胞肺癌A549和H460凋亡形态学特征。(3)采用小鼠腹水型肝癌细胞株H22于小鼠左腋接种，建立小鼠移植肿瘤模型后，将小鼠随机分为6组，以环磷酰胺(CTX)为阳性对照，0.5％CMC-Na为模型组，增设峨参水煎剂组，每日给药1次，每隔2天记录一次体重。14天后，每组处理7只小鼠，取出肿瘤组织、胸腺及脾脏，称重，计算动物死亡率、抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数及药物对小鼠的生命延长率。采用HE及免疫组化法检测肿瘤组织的坏死情况及组织中bcl-2及bax的表达情况。 结果：(1)峨参氯仿、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇提取物对A549和H460细胞的增殖均有抑制作用，除正丁醇外，另三个溶剂提取物在药物浓度为10μg/ml左右时，细胞死亡率均达50％以上。(2)峨参石油醚提取物处理A549和H460细胞24小时后，其IC50值分别为6.13μg/ml和0.97μg/ml。(3)肺癌细胞在一定浓度峨参石油醚提取物作用下，24小时和48小时后细胞出现明显的凋亡形态变化，包括细胞皱缩、出泡、细胞核碎裂、固缩、细胞骨架解体等，其中细胞核碎裂最为明显，且48小时内随着时间的延长凋亡越加明显，而0.1％DMSO的对照组细胞完整，并未出现以上现象。(4)DNAladder可观察到梯状的DNA凋亡电泳带。(5)峨参石油醚提取物高、低剂量组、峨参水煎剂组和CTX组对H22小鼠肝癌实体瘤的抑制率分别为60.80％、68.29％、62.56％、71.52％；对小鼠的生命延长率分别为21.2％、49.5％、68.8％、40.6％；胸腺指数分别为2.05±0.34、2.24±0.39、2.23±0.41、1.86±0.57，除CTX组外，其余药物组与模型组1.43±0.19比较p＜0.05，具有显著差异。脾脏指数分别为4.11±0.55、4.49±0.68、4.47±0.50、3.77±0.61，各药物组与空白组比较，均具有显著性差异(p＜0.05)。峨参石油醚提取物高、低剂量组、峨参水煎剂组和CTX组均能上调bax的表达，下调bcl-2的表达。 结论：峨参石油醚提取物对人非小细胞肺癌A549和H460细胞的增殖有明显的抑制作用及诱导凋亡的作用。峨参石油醚提取物及峨参水煎剂可抑制H22小鼠肝癌移植瘤的增长，减小肿瘤质量，延长小鼠的生存期，其促进细胞凋亡的机制可能是通过促进bax的表达，抑制bcl-2的表达实现的。峨参提取物在治疗肿瘤上表现出一定疗效，有望开发成治疗肿瘤的药物。
NETL