摘要
目的:为解决学术界在湖北麦冬分类地位上的分歧提供依据,为山麦冬属一种无学名植物的命名奠定基础。 方法: 1采集湖北麦冬、无学名植物及从形态或分布上看较有可能是其亲本或原变种的植物,栽培于花盆中,取其新鲜叶片提取基因组DNA。 2用正交设计法找到对提取物进行ISSR反应的最佳体系和反应条件。 3从ISSR引物序列表中随机选取52条ISSR引物,再从中筛选出10个条带清晰多态性高的引物。 4对所有供试植物的提取物进行ISSR。 5将ISSR结果转换成由0和1组成的数据矩阵,用软件SPSS16.0计算处理这种数据矩阵,以得到任意两个供试植物的相关系数,并构建聚类图。 6根据相关系数、聚类图,结合形态分类学、遗传学基本理论推断研究结论。 结果: 通过正交优化实验建立了反应过程稳定,反应产物能显出清晰条带的最佳ISSR反应体系和扩增程序,筛选出10条有效引物及其退火温度;10条引物共扩增出141条带,其中140条具有多态性,多态百分率为99.29%。各引物扩增的条带数为11-17条;聚类图显示同名不同产区植物中除了庐山短葶山麦冬和泉州短葶山麦冬外,余皆优先聚类,相关系数也显示,它们中的每两个同名植物的相关系数,大于该种植物与非同名植物的相关系数。庐山短葶山麦冬在聚类图里优先与山麦冬聚类,其次才与同名不同产地的泉州短葶山麦冬聚类。相关系数里显示,5号庐山短葶山麦冬与14号,15号山麦冬的相关系数的平均数为0.3375,几乎等于5号和6号植物的相关系数的平均数0.338.。湖北麦冬与无学名植物间的相关系数为0.373和0.415,大于湖北麦冬与其他供试植物间的相关系数;湖北麦冬与山麦冬间的相关系数为0.279和0.348,平均值为0.313,与庐山短葶山麦冬间的相关系数为0.319,表明湖北麦冬与山麦冬的遗传距离基本上等于它与庐山短葶山麦冬的遗传距离。湖北麦冬与山麦冬或庐山短葶山麦冬间的相关系数比湖北麦冬与无学名植物间的相关系数小,比湖北麦冬与其余供试植物(即禾叶山麦冬、阔叶山麦冬或沿阶草属的麦冬)间的相关系数大。 结论: 1虽然湖北麦冬与无学名植物的相关系数大于其余供试植物间的相关系数,但是由于两种植物都是开花不结果,因此不能将其中一方定为另外一方的变种或者变型。 2湖北麦冬与山麦冬的相关系数或者与庐山短葶山麦冬的相关系数,在大小上都是仅次于它与无学名植物的相关系数,考虑到它还有开花不结果的特性因此推断湖北麦冬是庐山短葶山麦冬和山麦冬的杂交种。 3无学名植物与山麦冬的相关系数在非同名供试植物间的相关系数中,仅次于它与湖北麦冬的相关系数,由此推断它是山麦冬的变种。 4泉州短葶山麦冬是庐山短葶山麦冬的变型,理由是:(1)庐山短葶山麦冬没有与泉州短葶山麦冬优先聚为一类,虽然在泉州短葶山麦冬与其他各供试植物的遗传距离里,以与庐山短葶山麦冬间的遗传距离最近,但是这一遗传距离几乎等于庐山短葶山麦冬与山麦冬间的遗传距离;(2)庐山短葶山麦冬是野生的,泉州短葶山麦冬是栽培的;(3)庐山短葶山麦冬的叶子呈革质,福建短葶山麦冬的叶子不呈革质,而叶片呈革质是短葶山麦冬正种的特征之一。
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