摘要
背景与目的： 子痫前期是产科常见疾病,是妊娠期特有的系统性疾病,可伴有多脏器功能损害或功能衰竭。子痫前期严重危及母儿生命及健康。国内外的专家学者对子痫前期做了大量研究,仍不能阐明其病因和发病机制。近年来,子痫前期被认为是母体的一种过度炎症反应,其中血管内皮细胞损伤及功能障碍是子痫前期发病的中心环节。 高迁移率族蛋白1(high mobility group box1,HMGB1)是核蛋白的一种,因其在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的高迁移力而得名。HMGB1于1999年首次被发现可以释放到细胞外后介导炎症反应,在局部和全身性炎症性疾病中作为一种重要的炎症细胞因子起作用。研究发现HMGB1作为一种重要的晚期炎性因子介导内毒素血症、系统性红斑狼疮、肺纤维化、类风湿性关节炎、病毒性肝炎、急性胰腺炎等疾病的病理过程。HMGB1通过与细胞表面受体相结合,通过一系列信号转导途径,促进炎症反应的发生和发展。 TLR4是TLRs家族成员研究最多,分布最广的一种跨膜受体,目前国内外研究证实TLR4在抵抗外来病源微生物入侵中起到关键作用,可以识别细菌,病毒以及其它一些病原体。其配体除了外源性之外,还有很多内源性配体,如热休克蛋白(heat shock protein,HSP)和HMGB1等。TLR4与其配体结合后,将信号传导到细胞内,导致下游的NF-κB等炎症因子级联激活,导致多种炎症因子的瀑布式释放,产生损伤效应。 本文应用PT-PCR法测定正常孕妇和子痫前期患者胎盘组织中HMGB1和TLR4 mRNA的表达和变化,免疫组化法检测二者蛋白的定位及表达,并分析二者的相关性。 材料与方法： 1、临床病例资料 选取郑州大学第一附属医院2010年5月至12月住院行剖宫产终止妊娠的患者90例,其中轻度子痫前期患者30例、重度子痫前期患者30例、正常晚孕妇女30例。轻度子痫前期患者平均年龄及孕周分别为(28.97±4.99)岁、(36.93±2.68)周,重度子痫前期患者平均年龄及孕周分别为(30.57±5.41)岁、(35.1±2.79)周。子痫前期诊断标准参照乐杰主编的全国高等院校统编教材《妇产科学》第7版。正常晚孕妇女30例多为头盆不称、臀位、前置胎盘等,患者平均年龄及孕周分别为(29.03±4.77)岁、(38.83±2.76)周。所有研究对象均排除原发性高血压、肝病、肾病、糖尿病、心脏病及甲状腺功能亢进等病史,无吸烟、饮酒、输血、免疫治疗史等。 2、实验方法 采用RT-PCR法检测胎盘组织中HMGBl及TLR4 mRNA的表达;免疫组化法检测胎盘组织中二者蛋白的定位及表达。 3、统计学分析 采用SPSS17.0进行统计分析,结果以-X±s表示,计数资料采用X2检验,计量资料采用单因素方差分析,相关分析采用Pearson积矩相关分析,检验水准α=0.05。 结果： 1.HMGB1 mRNA在轻、重度子痫前期患者胎盘组织中的表达水平均高于正常晚孕妇女,差异有统计学意义(P轻=0.000,P重=0.000),轻、重度子痫前期相比较差异无统计学意义(P=0.256);TLR4 mRNA在轻、重度子痫前期患者的胎盘组织中表达水平均高于正常晚孕妇女,差异有统计学意义(P轻=0.000,P重=0.000),轻、重度子痫前期相比较差异无统计学意义(P=0.130)。 2.HMGB1主要表达于滋养细胞胞质中,少量表达于间质细胞及血管内皮细胞胞质。HMGB1蛋白在轻、重度子痫前期患者胎盘中表达水平明显高于正常晚孕妇女,差异有统计学意义(P轻=0.032,P重=0.018),轻、重度子痫前期组之间比较差异无统计学意义(P=0.605);TLR4主要表达于滋养细胞胞膜及胞浆中。TLR4蛋白在轻、重度子痫前期组表达水平明显高于正常晚孕妇女,差异有统计学意义(P轻=0.038,P重=0.002),轻、重度子痫前期组之间比较差异无统计学意义(P=0.273)。 3.HMGB1和TLR4在子痫前期患者胎盘组织中的表达水平均呈正相关(mRNA水平r1=0.862,P1=0.000:蛋白水平r2=0.825,P2=0.000)。 结论： HMGB1及TLR4在子痫前期中表达升高,提示二者与子痫前期发病有关;二者的表达水平呈正相关,可能通过协同作用促进子痫前期的发生。
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