摘要
桂枝茯苓胶囊为我国传统的纯中药制剂，由桂枝、牡丹皮、桃仁、赤芍和茯苓五味药组成。它有抑制血小板聚集，降低血粘度，缓解子宫痉挛，镇痛等作用，能活血化瘀，缓消症块，用于治疗妇科血瘀症，子宫肌瘤，慢性盆腔炎，卵巢囊肿，痛经等，我们对其粗提物进行了药理活性的筛选，表明具有酪氨酸蛋白激酶抑制作用、C33A宫颈癌细胞生长抑制活性、DPPH抗氧化筛选和血清诱导血管平滑肌细胞增殖抑制活性，并对其活性部位进行了化学成分的研究。 作为其中的一味主药，茯苓(Poriacocos(Schw.)Wolf)为多孔菌科真菌茯苓的干燥菌核，我国资源丰富，全国各地均有栽培，主产湖北、安徽、云南等省。其性平，味甘、淡，归心、肺、脾、肾经，具有怯湿利水、健脾和胃、宁心安神的作用，多用于治疗小便不利，水肿胀满，痰饮咳逆，脾胃气虚，食少便溏，体倦乏力以及心神不安，惊悸，失眠等症。我们对其粗提物进行了肿瘤坏死因子生产抑制模型和C33A宫颈癌细胞生长抑制活性模型的筛选，发现茯苓乙醇提取物的乙酸乙酯部分和正丁醇部分有一定的活性。 本研究运用多种色谱技术和波谱技术，并结合化学方法，主要对茯苓乙醇提取物的乙酸乙酯部分和正丁醇部分以及桂枝茯芩胶囊的正丁醇和水部分进行了系统的化学成分研究。从茯苓中共分离鉴定了41个化合物，分别为pachymicacid(1)，eburicoicacid(2),tumulosicacid(3),trametenolicacid(4),dehydropachymicacid(5),dehydrotumulosicacid(6),dehydroeburicoicacid(7),dehydrotrametenolicacid(8),3-epi-dehydropachymicacid(9),3-epi-dehydrotumulosicacid(10),polyporenicacidC(11),6α-hydroxy-polyporenicacidC(12),6a-hydroxy-dehydrotumulosicacid(13),3βacetyl-16α-hydroxydehydrotrametenolicacid(14),pachymicacidmethylester(15),palmiticacid(16),oleanicacid(17),carbocericacid(18),ergosta-5,7,22-trien-3p-ol(19),ergosta-6,22-diene-5,8-epidioxy-3-01(20),3,5-dehydroxyergosta-7,22-dien-6-one(21),3β,5α,9α-trihydroxy-ergosta-7,22-diene-6-one(22),ergosta-7,22-diene-3-one(23),6,9epoxy-ergosta-7,22-diene-3-o1(24),ergosta-4,22-diene-3-one(25),3p,Sa,6β-trihydroxyl-ergosta-7,22-diene(26),ergosta-5,6-epoxy-7,22-dien-3-01(27),ergosta-4,6,8(14),22-tetraen-3-one(28),β-amyrinacetate(29),α-amyrinacetate(30),daucosterol(31),β-sitosterol(32),adenosine(33),ribitol(34),mannitol(35),oleanicacid3-o-acetate(36),a-D-glucose(37),α-D-Galactose(38),trehalose(39),galactitol(40),histidine(41),其中13为新化合物，化合物21-27,30,32,34-36,39-40为首次从该植物中分离得到；从桂枝茯苓胶囊中分离得到17个化合物，分别是oypaeoniflora(42)，caffeicacid(43),mudanpiosideF(44),guanosine(45),alanine(46),leucine(47),proline(48),arginine(49)，9个与茯苓中重复的化合物是5,6，9，10，11,33,37,39,40。 对茯苓中分得的部分单体化合物进行了活性筛选，采用MTT法测定了茯苓中分离得到的15个化合物对七种人肿瘤细胞(A549:人肺腺癌细胞；Bel-7402:人肝癌细胞；BGC-823：人胃癌细胞；HCT-8:人结肠癌细胞；A-2780:人卵巢癌细胞；KB:人鼻咽癌细胞；MCF-7:人乳腺癌细胞）的抑制作用。结果显示5个化合物(化合物2,3,4，16，20)对人癌细胞有抑制作用。 另外本文还阐述了高效液相色谱法测定桂枝茯苓胶囊中茯苓的4种化合物5,6，9，11的含量。本研究建立了HPLC法同时对桂枝茯苓胶囊中化合物5,6，9，11的含量测定，方法采用C18反相色谱柱，以乙腈一水(0.2％HCOOH)梯度洗脱方法，流速1ml.min-1，在242nm波长处检测4种有效成分的含量。四种成分的线性范围为dehydropachymicacid:0.192-0.96μg;dehydrotumulosicacid:0.408-2.04μg;3-epidehydropachymicacid:0.078-0.39μg;polyporenicacidC:0.0756-0.378μg;方法的样品回收率为96.3％，101.0％，98.5％和99.6％，样品的精密度为：1.2％，0.2％，0.2％，0.6％。建立的HPLC法能简便快速的测定桂枝茯苓胶囊中有效成分的含量，为完善该制剂的质量控制方法提供了参考。
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