摘要
维生素是微生物生长和代谢所必需的一类微量有机物。微生物培养基成分复杂，通常含有有机酸、氨基酸及微量的维生素等，其中维生素是生物必需的营养因子，在机体的营养和代谢中起着重要作用。添加适量维生素可刺激微生物的生长，促进某些微生物合成蛋白质，提高产量。但是微生物培养基中环境复杂，受很多因素影响，在生产中应进一步试验，以便筛选出不同维生素组成和不同发酵液中较合理的维生素添加量。 本文采用高效液相色谱法(HPLC)同时检测实际体系中的有机酸和水溶性维生素，以RP—HPLC为分离模式，选用HederaC18ODS-2色谱柱(5μm，4.6×250mm);20mmol·L-1的NaH2PO4溶液(pH2.9)和乙腈为流动相，梯度洗脱;检测波长为UV210nm;流速:1mL·min-1;建立了同时测定分析11种水溶性维生素和3种有机酸的方法，在15分钟内所有组分都洗脱完全;11种水溶性维生素和3种有机酸在0.8～3110μg/mL浓度范围内，维生素和有机酸峰面积与浓度呈良好的线性关系，相关系数为0.996～0.999，加标回收率在87.07％-101.1％之间，相对标准偏差(RSD，n=5)均小于5％。本方法采用同一种流动相既可以测定发酵液中的有机酸的含量又可以测定水溶性维生素的含量，是一种分析速度快，简单有效，准确度高的快速测定的方法。 在微生物的发酵过程中，培养基中初始营养成分在很大程度上决定了微生物发酵时的代谢途径，所以在发酵过程中对各种培养基成分进行全面的分析，可以提供比较完整的代谢流信息。其中微生物对一些少量的维生素及某些生长因子有特殊的需要。本实验也同时测定了几种主要培养基中的维生素含量。分析结果表明进口培养基中的含量普遍高于国产培养基。并分析了在以玉米浆和酵母膏为N源产丁二酸的发酵过程中维生素含量的变化以及这些变化与丁二酸含量之间的关系。 实验结果表明，该分析方法具有灵敏度高、快速，操作简便的优点，而且HPLC分析条件简单、对仪器要求较低、重现性好。本文所建立的方法经丁二酸及其他产品的实际检测分析结果验证。此方法能广泛用于酒类、食品、水产品等体系中维生素和有机酸含量的测定，是一种操作简便、普适性广、重复性优良的HPLC分析方法。
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