摘要
目的：CXCR7属于趋化因子家族的成员，在肿瘤生物学过程中发挥着重要作用。本研究主要阐述CXCR7与膀胱癌的相关性，探索CXCR7对膀胱癌细胞的生物行为学影响。 方法：⑴用Realtime PCR及免疫组化方法检测人膀胱癌组织及正常膀胱组织中CXCR7 mRNA及蛋白的表达水平。⑵用RT-PCR及流式细胞术方法检测2种人膀胱癌细胞株J82及T24中CXCR7 mRNA及蛋白的表达水平。⑶通过RT-PCR扩增CXCR7基因，酶切Lenti-easy-HA载体与CXCR7片段，经T4连接酶连接，构建Lenti-CXCR7-HA重组质粒。将慢病毒质粒转染293T细胞，产生慢病毒病毒液，感染人膀胱癌细胞株T24，经G418筛选，获得稳定过表达CXCR7的T24细胞。通过RT-PCR与流式细胞术分别鉴定CXCR7 mRNA及蛋白表达水平。⑷通过过表达人膀胱癌细胞T24中的CXCR7基因，研究其对膀胱癌增殖及凋亡能力的影响。 结果：①CXCR7 mRNA在膀胱癌组织中的表达(4.93±0.96)明显高于正常组织(1.18±0.15)(P=0.004)。在膀胱癌组织中CXCR7 mRNA的表达量还与分期以及肿瘤是否浸润肌层相关。在pTa-pT1期CXCR7 mRNA的表达量为（2.04±0.33），而pT2-pT4期表达量为（7.05±1.52）, 两组之间有显著统计学差异（P<0.05）。在G1级膀胱癌中CXCR7 mRNA的表达量为（1.83±0.36），而G2-G3级表达量为（6.33±1.31），两组之间有显著统计学差异（P<0.05）。②正常组织中CXCR7蛋白的阳性表达率明显低于肿瘤组织,分别为10%（3/30）和85.1%（126/148）。（P<0.01）.CXCR7蛋白在单发及多发肿瘤中的高表达率分别为49.4%（44/89）和71.2%(42/59)，在G1级、G2级、G3级膀胱癌CXCR7蛋白高表达的阳性率分别为34.0%(16/47)、65.8%（48/73）、78.6%（22/28），差异均有统计学意义（P<0.01）。非肌层浸润性肿瘤和肌层浸润性肿瘤中CXCR7蛋白高表达的阳性率为51.9%和72.7%，差异有统计学意义（P<0.05）。104例非肌层浸润性膀胱癌中，复发组与未复发组中CXCR7蛋白高表达的阳性率64.1%和32.5%，差异有统计学意义（P<0.01）。Kaplan-Merier曲线显示，CXCR7蛋白高表达组患者和CXCR7蛋白低表达组患者的术后无复发生存率相比较，差异有统计学意义。（P<0.01）。③人膀胱癌细胞株T24及J82 CXCR7两细胞株均表达CXCR7蛋白。④成功构建出Lenti-CXCR7-HA慢病毒重组质粒,转染293T细胞，产生高滴度病毒颗粒。⑤慢病毒稳定感染人膀胱癌细胞T24后，经G418稳定筛选，经RT-PCR及流式细胞术方法证明该方法显著上调了转染组细胞株CXCR7 mRNA和蛋白的表达。⑥过表达CXCR7组细胞较空白对照组，细胞增殖数量明显增多，具有统计学差异（P<0.05），而空白对照组细胞与未处理组之间并无明显差异（P>0.05）。⑦过表达CXCR7组细胞较空白对照组，凋亡率分别为（4.26±0.34）％和（25.44±1.30）％，（P<0.05），具有统计学差异。 结论：⑴CXCR7在膀胱癌组织中的表达明显高于正常组织，在转录和翻译水平都有过表达。⑵CXCR7的过表达与肿瘤的分级以及肿瘤是否浸润肌层有关。⑶在非肌层浸润性膀胱癌中，CXCR7过表达与患者的术后复发呈正相关。⑷T24及J82中，均有CXCR7 mRNA及蛋白的表达。⑸成功构建出Lenti-CXCR7-HA重组质粒，转染人膀胱癌细胞T24后可显著上调CXCR7mRNA和蛋白的表达。⑹CXCR7参与促进膀胱癌细胞的增殖功能。⑺CXCR7参与抑制膀胱癌细胞的凋亡功能。
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