摘要
目的:在临床应用及计算机分子对接模拟基础上推断FYG具有免疫调节功效，首先利用动物模型确认了FYG的免疫调节作用，继而在细胞水平进行了部分作用机制的探讨;回归临床评估扶正抑瘤颗粒(Fuzheng Yiliu Granules，FYG)影响消化道肿瘤患者围化疗期免疫调节及生活质量的临床疗效。 方法: 1.建立H22小鼠肝癌细胞的皮下移植瘤模型，然后随机分配到对照组（Vehicle，灌胃生理盐水），5-FU组（10mg/kg），5-FU+FYG组(10mg/kg+18g/kg)和FYG组(18g/kg)，给药5天后测量肿瘤重量和体积，检测CD3、CD4、CD8、Treg、NK细胞的百分含量、血清中白介素2(interleukin-2，IL-2)和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factorα，TNF-α)的浓度，肿瘤组织的凋亡情况及相关凋亡因子蛋白和基因的表达(Bax、Bcl-2、p53、C-myc)及5-FU靶酶胸苷酸合成酶(Thymidylate Synthase，TS)的表达水平。培养人肝癌细胞HepG2，FYG生药单独给药及联合5-FU给药后，噻唑蓝(Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide，MTT)检测细胞活力。SD大鼠灌胃FYG7天(高剂量组:25.2 g/kg;中剂量组:12.6 g/kg;低剂量组:6.3 g/kg)，取含药血清后检测IL-2和TNF-α的浓度，含药血清干预HepG2细胞后检测细胞活力、细胞增殖及凋亡情况。 2.按标准入选胃癌、大肠癌患者患者85例，按最小化随机分为治疗组50例、对照组35例;治疗组给予益气养阴中药联合FOLFOX4化疗方案，对照组给予安慰剂联合FOLFOX化疗方案。定期评估体力状况、生存质量、安全性。于基线期、化疗后第4周、第8周、研究结束时检测外周血T淋巴细胞及亚群(CD3、CD4、CD8、调节T细胞(Regulatory T cells，Treg)及CD4/CD8），自然杀伤细胞(Natural killingcells，NK)，免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)及补体(C3、C4)浓度。 结果: 1.FYG单独使用表现出一定的抗肿瘤功效和诱导凋亡作用（与对照组相比P＜0.05），肿瘤组织中Bax基因表达明显上调（P＜0.05），FYG+5-FU组小鼠肿瘤组织中野生型p53基因表达显著上调（P＜0.05）。FYG联合5-FU给药后显著抑制了小鼠皮下移植瘤的生长且诱导肿瘤组织发生凋亡（与对照组相比P＜0.01，与5-FU或FYG组相比P＜0.05），但未体现协同作用。FYG联合5-FU后上调了胸腺指数（与对照组相比P＜0.05）， FYG上调了被5-FU抑制的WBC及LY细胞数量（FYG+5-FU vs5-FU，P＜0.01; FYGvsvehicle,P＜0.01）。FYG组与对照组相比显著增加外周血中CD3（P＜0.01)，CD4（P＜0.01）及NK（P＜0.01）细胞的水平，抑制了Treg细胞的表达（P＜0.01）。FYG联合5-FU后增加了CD3和CD4的百分含量（与对照组相比P＜0.01），增加了CD3和NK细胞的百分比（与5-FU组相比P＜0.05)，降低了Treg的百分含量（与对照组相比P＜0.01，与5-FU组相比P＜0.01)。FYG组和FYG+5-FU组与对照组相比显著升高了血清中TNF-α的浓度（P＜0.01)上调肿瘤组织中Bax基因表达(与对照组相比P＜0.05，P＜0.01); FYG+5-FU组小鼠肿瘤组织中野生型p53基因表达显著上调（与对照组相比P＜0.05，P＜0.01)。 2.FY复方中多糖含量约占其干重的63％，FY单独或联合5-FU使用体外均未表现明显的抗肿瘤功效。FYG含药血清与对照组血清相比含有更高浓度的IL-2和TNF-α（P＜0.01，P＜0.05），剂量依赖性的抑制肿瘤细胞活力（P＜0.01），诱导肿瘤细胞凋亡（P＜0.01）、将肿瘤细胞阻滞在S期（P＜0.01），抑制肿瘤细胞增殖（P＜0.05）。 3.临床共入组病例85例，3例出组，可评价疗效病例82例，其中治疗组48例、对照组34例;治疗前二组基线资料分布均衡(P＞0.05)。治疗组相较对照组治疗后体力状况改善率提高了29.8％(P=0.025);总生活质量评分提高（P=0.040）;二组间症状领域中疲劳、纳差项目评分下降有显著差异（P＜0.05）;治疗期间未见明显益气养阴中药相关的不良反应。治疗组治疗后CD3、CD4、CD4/CD8、IgG、IgA、IgM、C3、NK细胞均有明显提高（P＜0.05），CD8、C4无明显提高(P＞0.05); Treg明显降低(P＜0.05)。与对照组相比，CD3、CD4、CD4/CD8、IgG、IgA、C3、NK细胞差异均有统计学意义（P＜0.05）。 结论: 1.FYG显著改善小鼠肝癌模型接受化疗药物后的免疫功能状态，促进肿瘤组织的凋 2.FYG需经体内代谢后才具有抑制肿瘤细胞增殖及促进凋亡的作用。 3.FYG改善化疗期胃癌、大肠癌患者临床症状，使生理状况好转，减轻疲倦、纳差症状。提高患者的免疫功能，改善其免疫抑制状态，具有双向调节作用。
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