蝙蝠蛾被毛孢菌丝体粉末胶囊中活性成分分析及增强免疫力功能研究

扫码查看

原文链接

NETL

中文摘要：以菌丝体为原料制成的保健品具有同天然虫草相似的功效如免疫调节，抗肿瘤、抗氧化等，占据了很大的市场份额。蝙蝠蛾被毛孢菌丝体粉胶囊是从天然冬虫夏草中分离出的无性型真菌“中国被毛孢”培育而成的菌丝体。但是从人工培育的菌丝体能否代替天然生长的虫草用于食疗和药用，而以菌丝体作为保健食品并没有一个统一的质量规范。因此本课题主要以粗多糖、腺苷、虫草素、甘露醇等主要活性成分来制定该产品的检测方法，测定活性成分的含量并进行其增强免疫力功能研究。为蝙蝠蛾被毛孢菌丝体粉末胶囊进行质量控制以及对保健食品的研究提供依据具有重要意义。课题研究内容主要包括两大方面: 一、蝙蝠蛾被毛孢菌丝体粉胶囊活性物质含量测定研究 1建立蝙蝠蛾被毛孢菌丝体粉末胶囊中粗多糖含量测定方法。方法:内容物质量体积比1∶100，沸水加热1h，取续滤液85％乙醇沉淀，重复3次后，苯酚-硫酸法于480 nm处测定吸光度值。结果:平均加标回收率为91.9％，相对标准偏差为1.34％。 2建立建立了高效液相法-二极管阵列检测器同时测定蝙蝠蛾被毛孢菌丝体粉胶囊中腺苷和虫草素的测定方法。方法:室温，以水为提取溶剂，质量体积比(m/v)1∶40，超声提取(超声功率250W)45 min，离心，取上清液，定容，摇匀，过0.45μm滤膜;色谱柱Ultimate ColumnTM C18(4.6×250mm，5μm);流动相:乙腈-水(5∶95，v/v);流速:1.0 mL/min;柱温:25℃;检测波长:260nm;进样量:10μL。结果:腺苷平均回收率100.49％，RSD=1.93％;虫草素平均回收率97.51％，RSD=4.71％。 3建立高效液相法-ELSD测定蝙蝠蛾被毛孢菌丝体粉胶囊中甘露醇含量的方法。方法:室温，质量体积比1∶25，超声水提90 min。色谱条件:氨基柱(Hypersil NH24.6 mm×300 mm，5μm)，流动相:流动相:乙腈-水(85∶15);流速:1.0 mL/min;柱温:30℃;漂移管温度为70℃，载气(N2)流速为2.72 mL/min，进样量20μL。结果:甘露醇平均回收率99.01％，RSD=3.52％，检出限150μg/mL。 4建立蝙蝠蛾被毛孢菌丝体粉胶囊中褪黑素含量的HPLC-MS测定方法。方法:以甲醇为提取溶剂，超声波提取褪黑素的方法。色谱条件:色谱柱:ThermoBeta Basic-18(150 mm×4.6 mm，5μm);流动相:甲醇:0.1％甲酸-水(60∶40);流速:0.6 mL/min;柱温:40℃。用串联离子阱质谱在电喷雾电离正离子(ESI+)-二级质谱(MS/MS)模式进行质谱测定。结果:方法的线性范围为10～200μg/kg，基质加标工作曲线线性方程为y=-8575.85+10204.8x，相关系数r=0.9992。方法的定性检出限为0.5μg/kg，定量检出限为2.0μg/kg，平均加标回收率为77.01％～85.02％，相对标准偏差＜10％。二、蝙蝠蛾被毛孢菌丝体粉胶囊增强免疫力功能研究对蝙蝠蛾被毛孢菌丝体粉胶囊进行增强免疫力保健功能的试验研究，研究内容包括:碳廓清实验测定;迟发型变态反应(DTH)检测;抗体生成细胞和血清溶血素测定;小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验（半体内法）和脏器/体重比值;ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验和小鼠NK细胞活性测定（乳酸脱氢酶LDH测定法）。根据《保健食品检验与评价技术规范》（卫生部2003）来判断蝙蝠蛾被毛孢菌丝体粉胶囊是否具有增强免疫力功能。

作者：

李晓明

展开 >

关键词：

蝙蝠蛾被毛孢菌丝体粉胶囊活性成分增强免疫力保健功能

授予学位：

硕士

学科专业：

药物分析学

导师：

黄宏南

学位年度：

2013

学位授予单位：

福建中医药大学

语种：

中文

中图分类号：