摘要
紫薇(Lagerstroemia indica)为干屈菜科落叶灌木或小乔木,原产我国,盛夏开花,花色艳丽,花期长,具有较高的观赏价值和园林应用价值。但在实际应用中尚存在一些问题,如抗寒性不够、缺乏大花品种等。多倍体因其基因累加效应而表现出抗性增强、器官巨大等优点。关于紫薇的组织培养研究,大多以茎段或丛生芽为研究对象,且增殖系数较低,对愈伤组织的诱导分化方面的研究较少。在本课题组前期研究基础之上,本论文以紫薇品种‘Hopi’、‘Pecos’、‘香雪云’(‘Xiang Xue Yun’)为材料,用秋水仙素处理播种苗生长点、胚芽进行多倍体诱导,并用秋水仙素和Oryzalin同时处理丛生芽以作对比,结合形态学、流式细胞术、染色体计数和气孔比较等方法进行倍性鉴定;以品种‘Pecos’开放授粉所得种子为实验材料,建立了高效的组培快繁体系。主要研究结果如下: 1、用秋水仙素溶液处理播种苗生长点、胚芽进行了紫薇多倍体诱导:得出1%的秋水仙素溶液处理‘Hopi’播种苗生长点48 h为最佳处理组合,存活率58.00%,变异率42.61%。‘Pecos’胚芽对秋水仙素敏感度高,最佳处理方式为秋水仙素浓度为0.1%处理8h,存活率和变异率分别为53.33%、50.00%。 2、用秋水仙素、Oryzalin溶液处理丛生芽诱导多倍体。两组处理的存活率都表现出随着诱变剂浓度的上升而下降的趋势,但‘香雪云’对秋水仙素更为敏感。综合处理后的丛生芽存活率、变异率和生长情况,0.006%的Oryzalin溶液处理‘香雪云’丛生芽24 h为最佳处理组合,存活率为63.33%,变异率为31.74%。 3、对处理后的紫薇品种进行形态学、流式细胞术、染色体计数、气孔比较,得到‘Hopi’同源四倍体植株1株,嵌合体10株;秋水仙素处理‘Pecos’胚芽得到四倍体0株,嵌合体5株;秋水仙素处理‘香雪云’丛生芽得到四倍体1株,嵌合体14株,除草剂Oryzalin处理‘香雪云’丛生芽得到四倍体1株,嵌合体20株;最终成功获得‘Hopi’同源四倍体植株1株,经观察四倍体与二倍体对照植株形态差异显著,叶片浓绿,叶表粗糙,叶形指数显著减小。 4、以‘Pecos’开放授粉所得种子为实验材料,建立了组培快繁体系:最佳灭菌方式为75%酒精浸泡30s后,0.1%升汞灭菌6 min;启动培养35 d的无菌苗真叶为最适宜诱导愈伤组织的材料,最适诱导培养条件为1/2 MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.5mg/L,暗处理5d后转入光下培养;最适愈伤增殖培养基为WPM+6-BA2.0mg/L+NAA0.05 mg/L,最适愈伤分化培养基为WPM+6-BA1.0 mg/L+NAA0.2mg/L,分化率为16.67%;丛生芽在培养基WPM+6-BA0.5 mg/L+ IBA0.02 mg/L中增殖效果最好;最佳生根培养基为1/2 MS+0.5 mg/L IBA,生根率为80%;移栽成活率达100%。 本研究成功获得紫薇同源四倍体资源,优化了紫薇组培快繁体系,为丰富和保存紫薇种质资源奠定了一定基础。