摘要
金刚果是中药菝葜的果实,是一种球形浆果,熟时为红色,含有多种营养成分可食用,能够一年四季挂于枝头不掉落,故得名金刚果。历来对菝葜的研究多偏重于其根茎的化学组成、抗癌抗肿瘤、抗氧化等作用,而对其果实的研究报道较少,仅涉及其营养成分和色素性质的研究。本课题选取崂山金刚果果肉和果皮为材料,对其生物活性成分及抗氧化活性等进行了详细研究,以期为新型天然抗氧化剂的开发、生产和应用提供依据。实验主要分三部分进行,具体研究内容及结果如下: 1、研究了崂山金刚果果肉和果皮各提取物中生物活性物质(维生素C、总黄酮、多酚以及花色苷)的含量、抗氧化活性(铁氰化钾还原法、DPPH法、邻二氮菲-Fe2+氧化法、Marklund法、铁螯合力法和烘箱法)以及上述两者之间的相关性。结果表明:(1)果皮中含有的生物活性物质的量要大于果肉;乙酸乙酯相萃取物中的维生素C、总黄酮和多酚的含量最多,而正丁醇相萃取物中的花色苷含量最大。(2)抗氧化活性结果表明:果皮的抗氧化活性普遍高于果肉。其乙酸乙酯相萃取物和正丁醇相萃取物拥有较好的清除DPPH自由基的能力和还原力。在浓度为50μg/mL时,对DPPH自由基的抑制能力最强的是乙酸乙酯相萃取物,抑制率达到81.82%,其次是正丁醇相萃取物,抑制率为74.92%,均比同浓度下的合成抗氧化剂BHT高。而甲醇氯仿粗提物则显示出较高的清除羟基自由基的能力和铁螯合力。在同浓度下,其清羟基能力比合成抗氧化剂强。石油醚相萃取物则有较强的抑制油脂过氧化的能力。(3)相关性研究结果证明:Vc、总黄酮和多酚的含量与DPPH法和还原力法之间具有良好的正相关(p<0.05)。 二、利用大孔吸附树脂对崂山金刚果果皮总黄酮和花色苷含量最高的提取物(乙酸乙酯相和正丁醇相萃取物)进行了纯化工艺的研究。结果为:(1)大孔吸附树脂纯化总黄酮类物质的最佳工艺条件为:上样流速1mL/min,上样溶液pH4.0;洗脱剂乙醇溶液浓度70%,洗脱剂流速1mL/min;(2)纯化花色苷类物质的最佳工艺条件为:上样流速1 mL/min,上样溶液pH2.0,洗脱剂乙醇溶液浓度30%,洗脱剂pH1.0,洗脱剂流速1mL/min。对纯化得到的总黄酮物质进行清除DPPH自由基能力的测定,结果表明:纯化后的物质具有更强的抗氧化能力,在浓度为50μg/mL下,其清除自由基能力从81.28%上升至90.07%。另外,将纯化后的花色苷物质进一步分离,依据显色反应和光谱分析推测,崂山金刚果果皮中分离得到的可能为芍药色素的衍生物。 三、以金刚果皮为原料,通过单因素实验和正交试验,对金刚果皮色素提取条件进行研究。结果表明色素提取的最佳条件为:提取温度60℃,提取时间1.5h,提取料液比30∶1(mL∶g)。另外采用DPPH法,Marklund法,邻二氮菲-Fe2+氧化法、铁氰化钾还原法及铁螯合力法测定其抗氧化活性,同时与合成抗氧化剂BHT和Vc对比。结果证明:该色素具有较强的抗氧化活性,在较低浓度时与同浓度的合成抗氧化剂相当(p<0.05)。