摘要
目的： 研究不同剂量X射线照射后不同时间点SD大鼠成熟精子透明质酸酶(hyaluronidase HYD)活性及富含胱氨酸分泌蛋白(CRISP2)基因mRNA表达水平的影响，比较其与照射后精子活力的关系，探讨电离辐射对精子活力影响的机制，为系统研究电离辐射对男性生殖功能的影响提供实验依据。 方法： 以辐射剂量0、1、2、4、6Gy随机分为5大组，每大组按1、4、8、12、24h时间点分为5小组。以Precise分直线加速器产生的X线局部照射活体SD大鼠外生殖系统（剂量率为442.89cGy/min），用改良明胶底物膜法检测大鼠成熟精子透明质酸酶活性，常规显微镜检测大鼠成熟精子活力，采用PCR技术检测大鼠成熟精子CRISP2基因mRNA表达水平。 结果： 1.精子HYD在X线照射后的活性变化。 对照组各时间点顶体内透明质酸酶阳性反应率为(70.2±1.92)％、(67.6±5.81)％、(69.8±2.16)％、(68±6.67)％、(71.2±2.86)％。4Gy、6Gyx射线照射不同时间(1、4、8、12、24h)后大鼠精子的HYD阳性反应率均较对照组显著下降(6.28＜t＜25.8，P＜0.05)，其中6Gy照射后24h HYD反应率最低(t=25.8，P＜0.01);2Gy x射线照射不同时间（1、4、8、12、24小时）后大鼠精子的HYD阳性反应率较对照组下降，但结果无统计学意义(0.47＜t＜1.313，P＞0.05)，2、4、6Gy照射组及对照组标本透明质酸酶反应率各时间点差异无统计学意义(P＞0.05)。 2.精子CRISP2基因mRNA在×线照射后的表达水平变化。4、6 Gy x射线照射不同时间（1、4、8、12、24h时）后大鼠精子的CRISP2基因mRNA相对表达量均较对照组显著下降(P＜0.05)，其中6 Gy照射24小时后相对表达量最低(P＜0.01)，而4Gy照射组与6Gy照射组相比较差异无统计学意义(P＞0.05);2 Gy x射线照射8h后CRISP2 mRNA相对表达量下降有统计学意义(P＜0.05);2 Gyx射线照射1、4h后及1Gy x射线照射不同时间(1、4、8、12、24h)后大鼠精子的CRISP2 mRNA相对表达量较对照组下降，但差异无统计学意义(P＞0.05)。 3. X线照射下精子活力与CRISP2基因mRNA及HYD的关系。 以0Gy照射组为对照组，其精子平均活力（A+B级）是(78.37±4.046)％，1、2Gy x射线照射不同时间（1、4、8、12、24小时）及4Gy x射线照射(1、4、8小时)后，精子活力与正常对照组相比无明显改变(P＞0.05);4Gy x射线照射12、24小时后大鼠精子活力显著低于正常对照;6Gy x射线照射不同时间(1、4、8、12、24h)后，精子活力明显低于对照组(P＜0.05)。精子活力与CRISP2基因mRNA及HYD的直线相关统计分析，得出呈直线相关，检验直线，相关系数分别为R=0.802(0.944)，F值=41.37(150.47)，P＜0.05。 结论： 1.不同剂量x射线照射可导致SD大鼠精子活力下降，这可能与其下调CRISP2基因的mRNA表达水平和HYD活性有关。 2.精子活力指标实验检测比单纯精子常规参数可能更具反映其活力状态。 3.在一定剂量范围内(2Gy)，精子受到X线照射后，CRISP2基因mRNA相对表达量不同时间点下降程度不同，可能与电离辐射损伤的后效应有关。
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