摘要
植物内生真菌种类丰富多样，在植物中分布广泛。近年来，已从植物内生真菌次生代谢产物中发现了许多具有新颖结构和独特生理活性的化合物。目前，植物内生真菌次生代谢产物抑菌活性的研究受到人们的广泛关注，将成为新的天然抑菌药物的重要来源。本文对药用植物三尖杉内生真菌进行研究，以期为寻找新型抗菌物质提供新的途径。 本文以采自秦岭太白山地区的三尖杉（Cephalotaxusfortunei）为研究对象，从其种皮、茎和叶中分离得到61株内生真菌。经形态学鉴定，其中产孢的52株内生真菌属于3目，5科，9属，而未产孢的9株暂未鉴定出。曲霉属（Penicilliumsp.）、青霉属（Penicilliumsp.）和链格孢属（Alternariasp.）为三尖杉内生真菌优势属，占总分离菌株的49.18％。并对其中的1株高活性菌株Se01进行分子鉴定，综合形态学鉴定和18SrDNA序列分析，确定其为曲霉属Aspergilluspiperis。 通过对61株内生真菌及其次生代谢产物的抑菌活性研究发现，菌株Se01、St16和St24对15种指示菌的抑菌圈直径在13～27mm范围内，表明这3株菌具有很强的抑菌活性。最后，确定以Se01为活性筛选的目标菌株。 对目标菌株Se01进行固体发酵，得到提取物粗品(98.33g)，采用硅胶柱层析、凝胶SephadexLH-20柱层析以及重结晶等一系列分离纯化方法，结果得到7个化合物。通过分析化合物的理化性质及波谱数据对其进行结构鉴定:化合物1为胶霉毒素、化合物2为大黄素-8-甲醚、化合物3为单甲基硫赭曲菌素、化合物4为柠檬酸二甲酯、化合物5为5α，8α-环二氧麦角甾-6，22-二烯-3β-醇、化合物6为麦角甾醇以及化合物7为D-甘露醇。 采用最小抑菌浓度(MIC)测定化合物对指示菌的抑菌活性，结果发现，化合物1、2、3和4对6种指示菌均具有一定的抑菌活性，化合物1、3、4、5和6对细菌的抑制作用强于对植物病原真菌的抑制作用。其中化合物1和3的活性最好，对部分指示菌的MIC与阳性对照相当。
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