摘要
绿茶受到研究者的密切关注主要是由于其药理活性成分儿茶素，主要包括四种多酚类物质:表儿茶酚(EC)，表没食子儿茶酚(EGC)，表儿茶酚没食子酸酯(ECG)和表没食子儿茶酚没食子酸酯(EGCG)，其中EGCG含量最多。研究表明，EGCG有抗氧化、抗菌、抗病毒、抗癌和降糖等多种活性，但是EGCG具有不稳定，脂溶性差，生物利用度低等缺点，在临床应用上受到一定的限制。本文制备了全乙酰化EGCG、全丙酰化EGCG和全丁酰化EGCG，以HepG2细胞、Hela细胞、α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶为模型，探讨酰化基团大小对抗癌活性和降糖活性的影响。主要内容有: (1)全酰化EGCG的制备酸酐为酰化剂与EGCG反应，吡啶为催化剂，在40℃反应数小时，TLC和HPLC监测反应终点。反应液经水洗、0.5mol/L碳酸钠溶液、饱和氯化钠溶液反复洗涤，收集有机层，无水硫酸钠干燥后过滤，真空浓缩处理，干燥即得产物。经HPLC检测其纯度分别为98.42％、98.86％和95.14％。 (2)理化性质研究对酰化产物进行溶解性、紫外吸收和油水分配系数等测定。结果表明:酰化之后几乎不溶于水，在有机溶剂中溶解度大幅度提高;EGCG在210nm和280nm处有较大吸收，而酰化产物最大吸收波长为250nm，最大吸收波长发生了蓝移;油水分配系数由小到大的顺序为lgPEGCG＜lgPAcEGCG＜lgPPrEGCG＜lgPBuEGCG。 (3)抗癌活性研究以HepG2细胞和Hela细胞为模型，研究酰化EGCG对其抑制作用。在1～1OOμg/mL浓度范围内，HepG2细胞中，EGCG和AcEGCG抑制率较低，PrEGCG和BuEGCG抗癌活性相当，IC50分别为54.631、23.081、17.121、15.351μg/mL;在Hela细胞中，抗癌活性大小EGCG＜AcEGCG＜PrEGCG＜BuEGCG，IC50分别为68.2、51.76、31.11、20.27μg/mL。细胞吸收药物实验表明，随酰化基团的增大，试药进入细胞的能力越强，抗癌活性越高。AcEGCG与Dox联用可以明显提高Dox对癌细胞的抑制作用，而且高浓度PrEGCG与中低浓度Dox联用，也有一定的协同效应，但是BuEGCG几乎没有相同效果。 (4)降糖活性研究以α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶为模型，研究酰化EGCG对其抑制作用。EGCG和酰化EGCG对α-葡萄糖苷酶的抑制分别呈明显的剂量依赖关系，抑制效果都强于阳性对照阿卡波糖。与EGCG相比，全酰化EGCG的抑制率都较高，IC50分别为291.3μg/mL、58.73.μg/mL、65.77μg/mL、61.39μg/mL。α-淀粉酶中出现相同结论，IC50分别为125.0μg/mL、101.4μg/mL、81.47μg/mL、61.59μg/mL。
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