目前，动脉粥样硬化(atherosderosis，AS)发生的主要学说之一是血浆中低密度脂蛋白发生氧化，使动脉管壁粥样斑块增多导致血管壁硬化，管腔缩小或闭塞，造成供血部位缺血性损害，最终发生一系列如冠心病、脑血栓、肾功能衰竭等并发症。抑制血浆中低密度脂蛋白的氧化可预防动脉粥样硬化的发生几率。近年来，从各种资源中提取分离抗血浆低密度脂蛋白氧化物质的研究报道日益增多。地鳖虫作为一种传统的中药材，具有解凝活血、接骨续筋、消肿止痛等药理活性。临床实践发现地鳖虫在调节脂代谢，抑制恶性肿瘤，抗衰老，治疗肝硬化等方面都具有康复和保健的功效。目前，地鳖虫对心血管系统的保护作用成为研究热点，但是对于地鳖虫抗动脉粥样硬化活性物质提取分离的研究未见有报道。因此，本论文以地鳖虫为原料，以抗血浆氧化活性为指标，提取抗血浆氧化活性物质，并对其工艺进行了优化，同时对地鳖虫中的抗氧化活性成分进行了分离纯化，主要结论归纳如下: 1.抗血浆氧化活性测定体系的建立 以200uL血浆作为反应的介质，Cu2+添加浓度为125mM，诱导发生氧化反应，生成的过氧化脂质产物MDA可达到最适量的含量范围;在此条件下，普罗布考抗血浆氧化活性可达70.1％，此活性作为测定抗血浆氧化活性的评价指标，以普罗布考作为抗血浆氧化反应的阳性对照。 2.地鳖虫抗血浆氧化物质提取工艺优化 选取不同的浸提试剂、溶剂浓度、浸提时间、浸提温度、料液比等因素对地鳖虫抗血浆氧化物质提取工艺进行优化，根据单因素实验结果对影响提取工艺的的主要因素进行分析，选取料液比、浸提时间和溶剂浓度三因素三水平进行正交试验，结果表明，料液比对本实验的结果影响最大，其次为溶剂浓度，最后是浸提时间。从地鳖虫中提取抗血浆氧化物质的最佳工艺参数为:乙醇作为浸提试剂，浓度75％，时间24h，浸提温度45℃，料液比1∶10，此条件下抗血浆氧化活性可达74.5％。 3.地鳖虫抗血浆氧化物质的分离及其成分初步分析 以乙醇提取物为原料，经过萃取分离，正/反相硅胶柱层析，SephadexLH-20凝胶渗透层析，重结晶和高效液相色谱等分离方法对地鳖虫抗血浆氧化物质进行分离纯化，初步分离了七种化合物，结果如下: 化合物1为无色透明油状;易溶于氯仿;样品重量2.66mg;硅胶薄层层析在展开剂为氯仿∶甲醇=100∶1下Rf=0.367，单一斑点，蓝紫色;HPLC用甲醇20％-50％梯度洗脱，在保留时间9.5min时出现单一峰;抗血浆氧化活性为34.8％。 化合物2为白色粉末状;易溶于甲醇;样品重量1.82mg;硅胶薄层层析在展开剂氯仿∶甲醇=20∶1下Rf=0.75，单一斑点，红色;HPLC用甲醇20％-50％梯度洗脱，在保留时间34.2min时出现单一峰;抗血浆氧化活性达32.1％。 化合物3为乳白色粉末状;易溶于甲醇;样品重量1.37mg;硅胶薄层层析在展开剂氯仿∶甲酵=15∶1下Rf=0.655，单一斑点，紫红色;HPLC用甲醇20％-60％梯度洗脱，在保留时间35min时出现单一峰;抗血浆氧化活性44.2％。 化合物4为无色透明晶体;易溶于甲醇;样品重量6.41mg;HPLC用甲醇20％-60％梯度洗脱，在保留时间13.2min时出现单一峰;抗血浆氧化活性41.4％。 化合物5为淡黄色粉末;易溶于甲醇;样品重量3.97mg;硅胶薄层层析在展开剂氯仿∶甲醇=10∶1下R严0.51，单一斑点，淡黄色;HPLC用甲醇20％-50％梯度洗脱，在保留时间34.5min时出现单一峰;抗血浆氧化活性65.0％。 化合物6为无色透明晶体;易溶于甲醇;样品重量12.45mg;HPLC用甲醇20％-60％梯度洗脱，在保留时间10min时出现单一峰;抗血浆氧化活性48.4％。 化合物7为亮黄色鳞片状;易溶于甲醇;样品重量7.71mg;硅胶薄层层析在展开剂氯仿∶甲醇=10∶1下Rf=0.41，单一斑点，亮黄色;HPLC用甲醇20％-50％梯度洗脱，在保留时间42min时出现单一峰;抗血浆氧化活性39.9％。
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