摘要
油菜是世界上重要的油料作物之一，利用其杂种优势是油菜品种改良的重要手段。回交育种是改良品种个别性状的有效方式，但具有育种年限长的缺点，采用分子标记辅助与回交育种相结合，快速定位目标基因，即达到了改良品种的目的又缩短了育种年限。本试验利用甘蓝型细胞核两对育性基因Ms3和Rf共同控制的雄性不育系9012A，采用三系化配套制种，克服了两系化制种中拔除50%可育株的缺点，通过临保系获得100%的不育株，节省了制种的成本。三系制种的关键是选育遗传背景相似的同型两型系和临保系，采用分子标记结合回交育种可在3-4个世代选育出遗传背景一致的纯合两型系和临保系。 本研究以9012A(ms3ms3RfbRfb)为供体亲本，沪油15(Ms3Ms3RfbRfc)和303A(Ms3Ms3RfbRfc)为受体亲本，通过分子标记辅助育种的手段，选育出具有沪油15和303A遗传背景的同型核不育系和临保系，保留了沪油15的优异性状，克服了303A的育性不稳定性，为甘蓝型油菜更多优势杂交组合的选育提供了优良材料。主要研究结果如下： 1、沪油15背景的纯合两型系与临保系的选育 1)对沪油15和9012A杂交后代F2代群体122株不育株(基因型为ms3ms3RfbRfb或ms3ms3RfbRfc)，采用AFLP标记进行背景选择，得到与沪油15遗传背景相近的5株与沪油15回交，得F2BC1群体。 2)将沪油15的F2BC1代群体的257株单株用与Rf连锁的SCAR标记WSC1做前景选择，挑选出Ms3ms3RfbRfc基因型的单株101株做背景选择，挑选出与沪油15遗传背景接近的3株与沪油15回交得F2BC2群体。 3)对沪油15的F2BC2代144个单株用与Rf位点连锁的共显性标记IBP36-1和与ms3连锁的标记BSR7、BSR67做前景选择，挑选基因为Ms3ms3RfbRfc的单株采用SSR标记做背景选择，挑选遗传背景与沪油15相近的3株与沪油15回交，得F2BC3代群体。 4)对沪油15的F2BC3代174个单株用与Rf位点连锁的共显性标记IBP36-1和与ms3连锁的标记BSR7、BSR67做前景选择，挑选出基因为Ms3ms3RfbRfc的单株39株，花期套袋自交，得F2BC3F2群体。 5)对沪油15的F2BC3F2群体的518个单株采用Ms3位点标记BSR64，BSR7；ms3位点连锁的标记BSR72，Rf位点共显性标记BRIP19、IBP36-1做前景选择，挑选出纯合两型系Ms3ms34RfbRfb55株、ms3ms3RfbRfb26株和ms3ms3RfcRfc29株。 2、303A背景的纯合两型系与临保系的选育 1)对303A和9012A杂交后代F2群体139株不育株(基因型为ms3ms34RfbRfb或ms3ms3RfbRfc)，采用AFLP标记进行背景选择，挑选出与303A遗传背景最为相似一株6Y77，花期与303A回交。得F2BC1群体。 2)将303A的F2BC1群体188株单株采用与Rf位点连锁的标记IBP36-1、WSC1做前景选择，选择出Ms3ms3RfbRfc基因型的单株96株，选择其中的94株做背景选择，挑选出与303A遗传背景接近的3株自交得F2BC1F2群体。 3)对303A的F2BC1F2群体花期取不育株46株用SSR引物做背景选择，挑选出5株遗传背景与303A相似的花期与303A回交，得F2BC1F2BC1(以下简称为F2BC2)代。 4)对303A的F2BC2群体采用Rf位点连锁的标记Brt22做前景选择，选择出Ms3ms3RfbRfc基因型的单株46株，花期自交得F2BC2F2。 5)对303A的F2BC2F2代群体的422个单株采用Ms3位点标记BSR64，BSR7，ms3位点连锁的标记BSR72，Rf位点共显性标记BRIP19、IBP36-1，选出纯合两型系Ms3ms34RfbRfb45株、ms3ms3RfbRfb19株和临保系ms3ms3RfcRfc21株。
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