摘要
目的： 勃起功能障碍(erectile dysfunction，ED)是前列腺癌(prostate cancer)冷冻消融治疗(cryoablation，Cryo)后最常见并发症之一。本研究旨在通过分析Cryo前后勃起功能和一氧化氮合酶(NOS)表达量的变化，初步探讨神经血管束(Neurovascular bundle，NVB)冷冻性损伤对ED的影响，从分子水平探讨前列腺癌冷冻消融导致ED的机制。 方法和材料： 选择雄性成年SD大鼠80只，随机分为对照组、实验组A、实验组B、实验组C。实验组A、实验组B、实验组C分别采用Endocare公司氩氦冷冻系统直径1.7mm冷冻器直视下冷冻大鼠前列腺周围的双侧NVB，温度分别控制在0℃、-40℃、-80℃;对照组只将冷冻器贴近双侧NVB，不开启冷冻系统。各组分别于Cryo前、Cryo后第2周、第4周、第9周随机选取5只实验大鼠行阿扑吗啡(APO)试验，观察勃起功能的变化;处死后取大鼠新鲜的阴茎海绵体组织行RT-PCR，检测nNOS-mRNA、eNOS-mRNA的相对表达量，分析各组大鼠NOS的变化趋势;取大鼠福尔马林固定的阴茎海绵体组织行免疫组化，分析nNOS和eNOS的IOD值。 结果： 1对照组、实验组A勃起次数在Cryo后第2周、第4周、第9周较Cryo前均无显著差异(P＞0.05);实验组B、实验组C在Cryo后第2周、第4周、第9周较Cryo前均显著减少(P＜0.001)。 2实验组A勃起次数在Cryo前、Cryo后第2周、第4周、第9周与对照组均无明显差异(P＞0.05);实验组B、实验组C在Cryo后第2周、第4周、第9周较对照组显著减少(P＜0.001);实验组C在第4周时勃起次数显著低于实验组B(0.2±0.45 Vs.2.0±1.58，P=0.040)。 3对照组、实验组A阴茎海绵体nNOS-mRNA相对表达量在Cryo后第2周、第4周、第9周较Cryo前均无显著差异（P＞0.05）;实验组B、实验组C在Cryo后第2周、第4周、第9周较Cryo前均显著降低(P＜0.001)。 4实验组A阴茎海绵体nNOS-mRNA相对表达量在Cryo前、Cryo后第2周、第4周、第9周与对照组均无明显差异(P＞0.05);实验组B、实验组C在Cryo后第2周、第4周、第9周较对照组显著降低(P＜0.001);实验组C在Cryo后第2周、第4周、第9周时均显著低于实验组B(P＜0.001)。 5对照组、实验组A阴茎海绵体eNOS-mRNA相对表达量在Cryo后第2周、第4周、第9周较Cryo前均无显著差异(P＞0.05);与Cryo前相比，实验组B在第4周（1.10±0.078 Vs.1.25±0.089，P=0.028）、第9周（0.77±0.050 Vs.1.25±0.089，P＜0.001）时显著降低;实验组C在第9周较Cryo前显著降低(0.84±0.073 Vs.1.19±0.035,P＜0.001)。 6实验组A阴茎海绵体eNOS-mRNA相对表达量在Cryo前、Cryo后第2周、第4周、第9周与对照组均无明显差异（P＞0.05）;实验组B、实验组C在第9周时较对照组显著降低(P＜0.001)。 7对照组、实验组A阴茎海绵体nNOS IOD值在Cryo后第2周、第4周、第9周较Cryo前均无显著差异(P＞0.05);实验组B、实验组C在Cryo后第2周、第4周、第9周较Cryo前均显著降低(P＜0.001);实验组C在Cryo后第2周、第4周、第9周均明显低于实验组B（P＜0.001）。 8实验组A阴茎海绵体nNOS IOD值在Cryo前、Cryo后第2周、第4周、第9周与对照组均无明显差异(P＞0.05);实验组B、实验组C在Cryo后第2周、第4周、第9周较对照组显著降低(P＜0.001)。 9对照组、实验组A阴茎海绵体eNOS IOD在Cryo后第2周、第4周、第9周较Cryo前均无显著差异(P＞0.05);与Cryo前相比，实验组B在第4周(7.17±0.280 Vs.7.93±0.122，P=0.002)、第9周(5.03±0.142 Vs.7.93±0.122，P＜0.001)时较Cryo前均显著降低;实验组C在第9周较Cryo前显著降低(4.90±0.629 Vs.7.82±0.317,P＜0.001)。 10实验组A阴茎海绵体eNOS IOD在Cryo前、Cryo后第2周、第4周、第9周与对照组均无明显差异(P＞0.05);与对照组相比，第9周时实验组B、实验组C显著降低(P＜0.001)。 结论： 1.NVB冷冻损伤是前列腺癌Cryo治疗导致ED的发生机制，且勃起功能随着时间会有所恢复; 2.NOS表达量的变化是前列腺癌Cryo治疗导致ED的分子基础; 3.冷冻温度是影响前列腺癌Cryo后ED的重要因素，温度越高越有利于勃起功能的恢复。
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