摘要
黄秋葵是一种适于广大地区耕种又具有较大经济潜力的新型蔬菜,其胶质中富含大量的营养成分,具有抗氧化抗癌等生理功效,为推进深加工的步伐,提高经济产值,本试验研究黄秋葵功能成分提取、活性机理、结构鉴定及应用,为开发保健及药用产品提供一定的依据。 本课题采用黄秋葵胶质多糖超声波法和纤维素酶法用响应面方法优化提取工艺,系统分析和优化工艺参数来提高胶质多糖的提取率;研究黄秋葵胶质粗多糖的抗疲劳作用,进一步明确黄秋葵抗疲劳的功能因子;对黄秋葵胶质粗多糖进行分离纯化,通过除蛋白、DEAE-52纤维素阴离子交换柱层析、葡聚糖凝胶柱层析分离出均一的纯品多糖组分,进一步分析单一纯品多糖的结构与单糖组成;开发黄秋葵胶质多糖口服液。 本试验的主要研究内容和结果如下: (1)超声波法提取黄秋葵胶质多糖优化试验得到,提取时间为38min,功率300W,料液比为1:40.9,进行验证性试验得到胶质提取率为27.46%;纤维素酶法当酶用量为1.125%,料液比为1:45,酶解时间为2.865h,纤维素酶法提取率可以达到26.689%。 对比两种提取方法,两种多糖均含有多糖类物质和少量蛋白质,而且均不含淀粉和酚类物质;超声波法得到的胶质多糖较纤维素酶法蛋白质含量降低40.9%,可有利于后续分离纯化工艺的进行,减少多糖含量损失。 (2)黄秋葵胶质多糖对小鼠体质量的增长具有显著的抑制作用,但是体重的变化并不是随着胶质多糖剂量的增加而减少,可以延长小鼠在缺氧环境下的存活时间,可以改善运动时机体缺氧的状况;黄秋葵水提液和胶质多糖中剂量组能够有效延长小鼠负重游泳时间,降低血清尿素氮含量,提高机体耐力,提高机体运动负荷承受能力;胶质低、中及高剂量组之间小鼠爬杆时间差异均影响极显著;中剂量组胶质明显抑制运动后小鼠血乳酸的升高,能提高小鼠体内乳酸脱氢酶的活性,从而加快对乳酸的清除;在一定有效的剂量范围之内,黄秋葵胶质多糖可以维持小鼠运动后肝糖原和肌糖原的含量,减缓其含量升高。 (3)从脱蛋白率和多糖保留率综合评价,聚酰胺吸附的方法要优于Sevag法和TCA法,更加温和,脱蛋白率和多糖保留率更高。 黄秋葵胶质粗多糖经DEAE-52柱层析分离纯化,用不同浓度的 NaCl溶液洗脱得到的4种多糖纯品,经SephadexG-100柱层析检验4种组分均为多糖纯品。红外光谱测定结果显示,4种组分均为多糖的特征吸收峰。通过高效液相色谱法分析得到,OGP-1水解的单糖有:鼠李糖、甘露糖;OGP-2水解的单糖有:鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖、甘露糖;OGP-3水解的单糖有:鼠李糖、甘露糖;OGP-4水解的单糖有:鼠李糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖。 (4)最终黄秋葵胶质多糖口服液的配方如下(10mL/瓶):5mg黄秋葵胶质粗多糖冻干粉、2mg甜菊糖、1.5mg黄原胶、2mg山梨酸钾。