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叶绿体转录调控因子CTF的功能研究

董志勇

叶绿体转录调控因子CTF的功能研究

董志勇1
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作者信息

  • 1. 中国科学院大学
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摘要

叶绿体作为一个半自主细胞器,具有自己的遗传信息表达系统。在叶绿体中的基因组大约为120-180 Kbp,其发育过程涉及到了大量叶绿体基因的表达。叶绿体基因的转录主要由两种RNA聚合酶PEP(plastid-encoded polymerase)和NEP(nuclear-encoded polymerase)参与,PEP是由叶绿体自身基因编码表达合成的,NEP是由核基因编码合成的。转录过程包括了启动子识别、转录起始、转录延伸和转录终止。因此叶绿体基因的转录调控过程势必非常复杂。 为了进一步揭示叶绿体基因表达调控对叶绿体的发育和功能实现的重要作用,我们通过筛选T-DNA插入突变的拟南芥突变体库,获得一个有高叶绿素荧光表型的突变体,根据蛋白功能数据库预测该基因表达的蛋白是一种叶绿体基因的转录因子类似物,我们将这个突变体命名为ctf(chloroplast transcriptionrelated factor),然后以这个突变体为材料设计一系列生理生化实验来研究该基因缺失对叶绿体基因转录调控的影响,主要结果如下: 1、ctf突变体体型较小,叶色发黄、圆形无缺刻,花期并不受到影响,而且目的基因在各个组织器官广泛表达,以茎中表达量最高,根中表达最低。通过蛋白定位实验确认CTF很有可能定位于叶绿体。 2、根据叶绿素荧光慢诱导曲线、P700曲线以及免疫印迹试验可以判断,突变体中主要受影响的是PSⅡ,并通过BN-PAGE和二向的SDS-Urea-PAGE电泳检测的结果也显示出PSⅡ核心蛋白减少很多,这些结果充分说明,ctf是一个PSⅡ严重受损的突变体。 3、由于ctf的突变,导致psbE、psbF、psbL和psbJ的转录下降,最终导致PSⅡ复合物的核心蛋白D1、D2、CP43、CP47积累明显减少。

关键词

叶绿体/光系统Ⅱ/转录调控因子/RNA聚合酶

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授予学位

硕士

学科专业

细胞生物学

导师

卢从明

学位年度

2013

学位授予单位

中国科学院大学

语种

中文

中图分类号

Q94
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