摘要
目的：观察甲醛对雄性小鼠的生殖毒性作用,初步探讨枸杞多糖对甲醛致雄性小鼠生殖毒性的拮抗作用。 方法：健康雄性昆明种小鼠96只,随机分为8组,甲醛低、中、高(0.2、2.0、20mg/(kg.d))剂量组,枸杞多糖低、中、高(50、100、200mg/(kg.d))剂量拮抗组,阳性对照组(环磷酰胺(50mg/(kg.d)))和阴性对照组(生理盐水)。甲醛染毒组和阴性对照组采用腹腔注射方式,每天1次,连续14d,阳性对照组采用腹腔注射方式,隔天1次,共14d。枸杞多糖拮抗组腹腔注射高剂量甲醛,同时灌胃不同剂量枸杞多糖溶液,每天1次,连续14d。给药结束后,处死小鼠,计算小鼠附睾、睾丸脏器系数,显微镜下计数小鼠精子数量、活动率和畸形率,测定小鼠睾丸组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量、葡萄糖6磷酸脱氢酶(G-6-PD)和山梨醇脱氢酶(SDH)活力,观察睾丸组织病理学改变,化学发光法检测小鼠血清中睾酮(T)水平,免疫组化技术检测凋亡相关蛋白bax和bcl-2表达,流式细胞术检测睾丸生精细胞凋亡率。 结果：甲醛低、中、高剂量染毒组睾丸脏器系数与阴性对照相比,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);枸杞多糖低、中、高剂量拮抗组与甲醛高剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。精子计数和活动率随甲醛染毒剂量的增加呈下降趋势,精子畸形率呈上升趋势,与阴性对照组相比,甲醛低、中、高剂量染毒组精子计数、活动率和畸形率差异均有统计学意义(P<0.01);枸杞多糖低、中、高剂量拮抗组与甲醛高剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。甲醛低、中、高剂量染毒组血清中T含量逐渐降低,与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);枸杞多糖低、中、高剂量拮抗组与甲醛高剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。睾丸组织SOD随甲醛染毒剂量增加,逐渐下降,甲醛低、中、高剂量染毒组与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);枸杞多糖中、高剂量拮抗组与甲醛高剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。甲醛各染毒组MDA含量逐渐增高,中、高剂量染毒组与阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01);枸杞多糖低、中、高剂量拮抗组与甲醛高剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。睾丸组织G-6-PD、SDH活性随甲醛染毒剂量增大而降低,甲醛低、中、高剂量染毒组G-6-PD、SDH活性与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);枸杞多糖中、高剂量拮抗组与甲醛高剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。甲醛各染毒组bax阳性表达率增高,bcl-2表达下降,枸杞多糖拮抗组bax表达下降,bcl-2表达增高,甲醛低、中、高剂量染毒组与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);枸杞多糖低、中、高剂量拮抗组与甲醛高剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。各实验组之间,生精细胞凋亡率均无统计学意义(P>0.05)。甲醛中、高剂量组与阴性对照组比较,睾丸组织病理学有明显改变。枸杞多糖中、高剂量组与阴性对照相比,睾丸组织结构基本一致。 结论：1甲醛染毒雄性小鼠具有生殖毒性,表现为:精子数量和质量的变化;睾丸组织病理学变化;睾丸标志酶活性下降;凋亡相关蛋白bcl-2、bax表达异常;2甲醛致雄性小鼠生殖毒性的机制可能为:引起睾丸组织氧化损伤;影响生殖内分泌功能;3LBP具有拮抗甲醛致雄性小鼠生殖毒性的作用,其机制可能为:抗氧化作用减轻睾丸组织氧化损伤;改善生殖内分泌功能。
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