摘要
水稻是全球主要粮食作物，旱稻，又叫做陆稻，性耐旱，是适合在旱地种植的栽培稻，是水稻的变异型。采用生物技术分离抗旱基因，并通过转基因方法培育早稻抗逆新品种，是提高作物产量的有效途径，本课题以早稻成熟种子为外植体，利用农杆菌转化的方法，将抗逆基因LEA转入植物基因组中，从而获得转基因抗逆性早稻新品种。 为了使LEA基因在植物体内更高效的表达，将LEA基因构建到pCAMBIA3301中，在多克隆位点插入泛素启动子，并且用Bar基因做为筛选标记基因。将构建好的表达载体pCAMBIA3301-LEA质粒转入农杆菌Agl-1中，用农杆菌转化法将目的片段导入早稻中。将已得到的转基因早稻植株进行DNA水平的鉴定。 对的得到的转基因旱稻的种子进行DNA提取，设计目的基因LEA引物，进行PCR扩增，初步筛选已将LEA基因整合到早稻基因组中阳性植株，待到T3代种子时，可通过Tail-PCR技术来确定目的基因的插入位点，通过RT-PCR鉴定目的基因在基因组中是否表达，确定稳定遗传的早稻的新品系。
NETL