摘要
大豆(Glycinemax(L.)Merr.）是一种重要的经济作物，为人类提供丰富的油料和优质的蛋白。生殖性状的发育是农产品形成的基础，直接影响到其产量和品质，因此花器官发育分子调控机制的研究对大豆种质改良具有重要意义。MYB转录因子是最大的植物转录因子家族成员之一，参与植物的发育、激素信号传导、次级代谢的调控、生物和非生物胁迫的应答等，对花等器官形态建成具有重要的调节作用。 本研究通过基因芯片技术从大豆的花中鉴定的多个花器官优势表达基因，选择其中1个编码MYB转录因子的基因片段（Gma.18002.1.S1_at）进一步研究。将该基因片段进行EST拼接，序列比对发现其为NCBI网站上已命名的基因GmMYB181(DQ822906)。本研究进一步分离克隆GmMYB181基因cDNA全长序列，通过组织表达分析、亚细胞定位、酵母系统检测其转录激活活性、转基因拟南芥等方法对该基因的功能进行初步分析。 主要结果如下: 1.GmMYB181基因的克隆及序列分析 从大豆花中克隆得到GmMYB181基因的cDNA全长序列，包含一个长为624bp的开放阅读框，编码208个氨基酸。系统进化分析表明，GmMYB181与其他物种的MYB蛋白如三花龙胆GtMYB、葡萄VvMYB24以及拟南芥中AtMYB21和AtMYB24亲缘关系比较近。 2.GmMYB181基因的表达特性分析 利用实时荧光定量PCR及半定量RT-PCR分析GmMYB181基因在大豆各组织器官中的表达情况。结果显示GmMYB181基因在大豆花器官中特异性表达，在营养器官中不表达。亚细胞定位结果表明GmMYB181蛋白定位于细胞核中，可能具有转录激活活性。 3.转基因拟南芥表型分析 用Gateway技术体系构建GmMYB181基因的植物过表达载体，利用农杆菌介导法转化拟南芥。将GmMYB181在拟南芥中异源表达，发现35S∷GmMYB181转基因拟南芥出现花萼卷曲、长角果较短小、植株矮化等变异性状。这些结果说明GmMYB181参与了植物花器官发育的调控，可能在植物的果实及株型的发育过程中也发挥重要作用。
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