摘要
目的:探讨鱼腥草素钠(sodium houttuyfonate，SH)防治肺纤维化（pulmonaryfibrosis，PF）的药效及作用机制，为此药的应用和开发提供研究依据。 方法:用鱼腥草素钠对博莱霉素(bleomycin hydrochloride，BLM)诱导的PF小鼠模型进行干预治疗，检测有关指标，并对其作用机制进行初步探索。将225只雄性昆明种小鼠，随机分成正常组(control)(n=45)、模型组(BLM)(n=45)、醋酸泼尼松(BLM+PA)组(n=45)、鱼腥草高剂量组(BLM+SH High)(n=45)、鱼腥草低剂量组(BLM+SH Low)(n=45)，再将每个组平均随机分成三小组(7天、14天、28天)，control组一次性气管内灌注生理盐水，其余各组一次性气管内灌注BLM（5mg.kg-1）造成小鼠PF模型，造模第二天，BLM+PA组灌胃给予醋酸泼尼松(PA)（5mg.kg-1）、BLM+SH High组给予鱼腥草素钠(90mg.kg-1)、BLM+SH Low组给予鱼腥草素钠(45mg.kg-1)，control组和BLM组给予等剂量的蒸馏水。每三天称量动物体重，并于给药后第7天、14天、28天分批处理，观察肺重指数(FW/BW)变化，取肺组织运用ELISA试剂盒指导方法，检测以下指标:白介素-6(IL-6)、羟脯氨酸(Hyp)、白介素-1 beta(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α);肺组织病理变化情况使用HE染色方法进行评价;运用天狼猩红染色方法观察肺组织胶原蛋白含量的变化情况;运用RT-PCR技术，对肺组织肺纤维化相关基因TGF-β1mRNA基因含量的表达情况进行评价;利用Westernblot方法，检测肺组织肺纤维化相关通路(TGF-β1/Smad)有关蛋白含量的表达。 结果:与control组比较，第七天开始模型组动物PW/BW增加、肺组织Hyp含量、IL-1β，IL-6，TNF-α浓度升高(P＜0.05);部分肺泡腔缩小、萎缩、肺泡壁小叶间隔明显增宽，结构受损，肺纤维化瘢痕形成;Ⅰ、Ⅲ型两种胶原蛋白含量逐步上调;TGF-β1mRNA含量表达上调;TGF-β1及PSmad2/3蛋白表达增强。与BLM组相比，BLM+SH High、BLM+SH Low组在第14天、28天动物PW/BW均显著降低(P＜0.05); BLM+SH High组在28天时肺组织Hyp含量显著下调(P＜0.05); BLM+SH High、BLM+SH Low组在三个处理时间肺组织IL-6含量均显著降低(P＜0.05); BLM+SH High可在三个处理时间显著降低肺组织TNF吨含量(P＜0.05); BLM+SHLow可在28天时明显降低TNF-α含量(P＜0.05);BLM+SH High、BLM+SH Low在三个时间点均能显著降低IL-1β(P＜0.05);BLM+SH High在三个处理时间均可显著降低肺组织胶原含量(P＜0.05)，BLM+SH Low在7天、28天两个时间点均可显著降低肺组织胶原含量(P＜0.05);肺组织HE染色结果显示BLM+SH High、BLM+SH Low组小鼠肺组织结构破坏减轻、炎症细胞浸润及局部纤维增生减轻，效果以BLM+SH High组较强;而BLM+PA组各项指标均较BLM组有显著改善(P＜0.05)。RT-PCR结果显示BLM+SH High、BLM+SH Low组均能够不同程度降低PF小鼠肺组织TGF-β1基因表达。Western blot结果显示BLM+SH High、BLM+SH Low均能不同程度的降低小鼠肺组织TGF-β1及磷酸化smad2/3蛋白的表达，差异具有统计学意义(P＜0.05)。 结论:鱼腥草素钠具备减轻博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的作用，其机制可能与通过降低相关炎症因子和肿瘤坏死因子的表达、降低组织中羟脯氨酸含量及调节肺纤维化相关基因TGF-β1及其相关smad蛋白通路的表达、改善肺功能等有一定关联。
NETL