摘要
目的:比较鸡内金炮制前后成分及消食、抗溃疡、抗结石方面的作用差异，探讨鸡内金的炮制机理;建立生、制鸡内金的质量标准，为保证临床用药的质量提供科学依据。 方法:采用SDS-PAGE电泳方法对从全国各地收集的生、制鸡内金进行蛋白质的鉴别;建立生、制鸡内金的指纹图谱，比较了炮制前后成分的差异。以小肠推进率和胃排空率为指标，比较生、制鸡内金对正常小鼠胃肠运动的作用差异;通过溃疡评分及胃液、胃酸分泌，对比生、制鸡内金对幽门结扎型胃溃疡大鼠的干预作用;通过体外模型，考察生、制鸡内金对草酸钙结晶的干预及消石作用;以乙二醇和氯化铵造成大鼠肾结石模型，考察鸡内金对结石的干预作用，探讨生、制鸡内金抗结石的作用机制。建立生、制鸡内金的质量标准，以薄层色谱法鉴别生、制鸡内金的甾体及蛋白成分;采用考马斯亮蓝法测定游离蛋白质含量，以柱前衍生法测定水解氨基酸的含量;测定生、制鸡内金胃蛋白酶的效价。 结果:1.SDS-PAGE电泳结果显示，生鸡内金在10-250KD有8条共有蛋白质谱带，制鸡内金大分子蛋白质降解为22KD以下的小分子蛋白;经过指纹图谱分析，生鸡内金有12个共有峰，制鸡内金有15个共有峰，炮制后有新成分生成，且大部分成分含量增加。 2.生、制鸡内金有促进小鼠胃肠运动的作用，可加速正常小鼠小肠推进和胃排空作用，制品作用更为显著;两者均能抑制幽门结扎型胃溃疡大鼠的胃壁损伤情况，给药后大鼠胃液分泌量显著增加，胃内游离酸及总酸浓度下降，降低了胃酸累积对胃黏膜的损伤;体外实验证明鸡内金有预防及消石的作用，作用效果随浓度增加而加强，以制品效果更好，结石的预防以抑制草酸钙结晶从COD向COM转化，消石作用以促进草酸钙结晶从COM向COD晶型转化;生、制鸡内金可以干预大鼠肾草酸钙结石的生成，单位时间内排尿量增加可加速结石的排泄，血中肌酐、尿素氮含量降低，血、尿中的草酸及尿酸含量降低，缓解造模引起的肾功能损伤，且具有一定的抗氧化能力。 3.建立了鉴别生、制鸡内金中的甾体及蛋白类成分的薄层色谱方法;生鸡内金含游离蛋白均为0.472％，制鸡内金含游离蛋白均为0.109％;炮制后鸡内金16种水解氨基酸含量不同程度的降低，氨基酸总量由746.06±172.52降低为456.98±156.48(mg/g)，比较不同炮制程度的样品发现炮制不够或炮制过度的样品氨基酸含量均比正常炮制的样品含量低;鸡内金生品的胃蛋白酶平均活力为8.5422±3.6645 u/g，制鸡内金平均活力为0.4069±0.3901 u/g，鸡内金经过高温炮制后，胃蛋白酶活力明显降低。 结论:鸡内金炮制后可使大分子蛋白降解，蛋白质和氨基酸的含量降低，胃蛋白酶的活性降低，但特征指纹图谱显示很多成分含量增加;炮制后也增强了对胃肠运动的促进、抗胃溃疡和抗结石作用，说明鸡内金的蛋白质类成分并非唯一药效组分，另有其它有效成分在发挥作用，初步阐明炮制的机理。建立的完整鸡内金饮片质量标准可控制鸡内金的质量。
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