摘要
目的:建立单纯疱疹病毒（Herpes Simple Virus）Ⅰ型和Ⅱ型、人乳头瘤病毒（Human Papillomavirus）6型和11型的LAMP检测方法。 方法:分别设计扩增各型病毒特异基因的LAMP引物，提取病毒DNA，配置LAMP反应体系，60～65℃保温约60 min，完成对靶病原体基因的扩增，肉眼及电泳判定扩增结果。LAMP扩增产物经酶切进一步鉴定；设立对照组，评价LAMP方法的特异性；10倍系列稀释模板，检测LAMP技术的敏感性。 结果:实验组经LAMP后，肉眼观察到LAMP扩增产物的出现，电泳后呈LAMP特征性梯状条带，对照组均无扩增产物；HSV及HPV LAMP扩增产物经相应限制性内切酶酶切鉴定正确，特异性实验结果显示与对照组无交叉反应，具有特异性；LAMP可检测到单纯疱疹病毒Ⅰ型、单纯疱疹病毒Ⅱ型、人乳头瘤病毒6型、人乳头瘤病毒11型DNA的最低浓度分别是1 pg/μL、10 pg/μL、1 pg/μL、1 pg/μL，其敏感性与PCR相当。 结论:建立了检测单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型、人乳头瘤病毒6型和11型的LAMP检测方法，实验结果显示该法特异和敏感，有望用于临床检测。
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